Еще значения слова и перевод ПЕРЕКРЕСТНО-РЕАГИРУЮЩИЕ АНТИГЕНЫ с английского на русский язык в англо-русских словарях и с русского на английский язык в русско-английских словарях.

More meanings of this word and English-Russian, Russian-English translations for the word «ПЕРЕКРЕСТНО-РЕАГИРУЮЩИЕ АНТИГЕНЫ» in dictionaries.

• ПЕРЕКРЕСТНО РЕАГИРУЮЩИЕ АНТИГЕНЫ — 1) interfering antigens 2) shared antigens
  
• АНТИГЕНЫ — Antigens
  Русско-Американский Английский словарь
• ПЕРЕКРЕСТНО — (напр. закрутить гайки, винты) in crisscross manner
  Русско-Английский словарь по строительству и новым строительным технологиям
• SHARED ANTIGENS
  
• INTERFERING ANTIGENS — близкородственные антигены, перекрёстно реагирующие антигены
  Новый Англо-Русский словарь по биологии
• CROSS-REACTING HAPTENS
  Новый Англо-Русский словарь по биологии
• CROSS-REACTING ANTIGENS
  Новый Англо-Русский словарь по биологии
• SHARED ANTIGENS — близкородственные антигены, перекрёстно реагирующие антигены
  
• INTERFERING ANTIGENS — близкородственные антигены, перекрёстно реагирующие антигены
  Новый Англо-Русский биологический словарь
• CROSS-REACTING HAPTENS — перекрёстно реагирующие гаптены, перекрёстно родственные гаптены
  Новый Англо-Русский биологический словарь
• CROSS-REACTING ANTIGENS — близкородственные антигены, перекрёстно-реагирующие антигены
  Новый Англо-Русский биологический словарь
• ЭВОЛЮЦИОННО ДАЛЕКИЕ АНТИГЕНЫ — - далекие антигены
  Новый Русско-Английский биологический словарь
• ЧУЖЕРОДНЫЕ АНТИГЕНЫ
  Новый Русско-Английский биологический словарь
• ПЕРЕКРЕСТНО РЕАГИРУЮЩИЕ ГАПТЕНЫ — cross-reacting haptens
  Новый Русско-Английский биологический словарь
• НЕРОДСТВЕННЫЕ АНТИГЕНЫ — (антигены, не имеющие общих детерминант) "nonshared" antigens
  Новый Русско-Английский биологический словарь
• ДАЛЕКИЕ АНТИГЕНЫ — - эволюционно далёкие антигены distantly related antigens
  Новый Русско-Английский биологический словарь
• COMMON ANTIGENS — гетерогенные антигены, гетерофильные антигены, перекрестно реагирующие антигены
  Новый Англо-Русский медицинский словарь
• КРОВЬ — КРОВЬ У человека и высших животных на поверхности клеток крови, особенно эритроцитов, имеются генетически обусловленные факторы - т.н. вещества групп …
  Русский словарь Colier
• STICKY ANTICIPATIONS — медленно меняющиеся или реагирующие на обстановку антиципации, неэластичные ожидания
  
• INTERCROSS — гл. 1) взаимно пересекаться 2) скрещивать(ся) (о разных породах) 3) перекрестно опылять, переопылять перекрестное опыление, переопыление межпородное скрещивание (взаимно) пересекаться …
  Большой Англо-Русский словарь
• HETEROGENETIC ANTIGENS — иммунологичегкие сходные антигены, находящиеся в неродственных организмах
  Большой Англо-Русский словарь
• CROSSING SYMMETRIC — мат. перекрестно симметричный
  Большой Англо-Русский словарь
• — мат. перекрестно симметричное представление
  Большой Англо-Русский словарь
• CROSSING-ODD VARIABLE — мат. перекрестно нечетная переменная
  Большой Англо-Русский словарь
• CROSSING-EVEN VARIABLE — мат. перекрестно четная переменная
  Большой Англо-Русский словарь
• CROSSBAR — 1. поперечина; траверса; поперечная балка, перекладина; распорка; раскос 2. перемычка 3. горн. верхняк 4. горизонтальная колонка (бурильного молотка) 5. ребро …
  Большой Англо-Русский словарь
• CROSS-PLY LAMINATE — перекрестно-армированный слоистый пластик
  Большой Англо-Русский словарь
• CROSS-INTERLEAVED — cross-interleaved вчт. перекрестно- перемежаемый
  Большой Англо-Русский словарь
• CROSS-FERTILIZE — гл. перекрестно опылять (растения) (ботаника) перекрестно опылять (зоология) перекрестно оплодотворять cross-fertilize перекрестно опылять (растения)
  Большой Англо-Русский словарь
• CROSS-FERTILIZE — Перекрестно опылять
  Американский Англо-Русский словарь
• INTERCROSS — 1. ʹıntəkrɒs n 1> перекрёстное опыление, переопыление 2> межпородное скрещивание 2. ͵ıntəʹkrɒs v 1. (взаимно) пересекаться (о линиях и …
  
• CROSS-FERTILIZE — v 1> бот. перекрёстно опылять 2>
  Англо-Русско-Английский словарь общей лексики - Сборник из лучших словарей
• CROSS-PLY LAMINATE
  Большой Англо-Русский политехнический словарь
• CROSS-PLY LAMINATE — перекрёстно-армированный слоистый пластик
  Большой Англо-Русский политехнический словарь - РУССО
• SYMMETRIC — 1) симметрирующий 2) симметрический 3) симметричный. absolutely symmetric function — абсолютно симметрическая функция almost symmetric channel — почти симметричный канал axially symmetric field — …
  
• CROSSING-SYMMETRIC REPRESENTATION — матем. перекрёстно симметричное представление
  Англо-Русский научно-технический словарь
• CROSSING-ODD VARIABLE — матем. перекрёстно нечётная переменная
  Англо-Русский научно-технический словарь
• CROSSING-EVEN VARIABLE — матем. перекрёстно чётная переменная
  Англо-Русский научно-технический словарь
• CROSSING SYMMETRIC EXPRESSION — матем. перекрестно симметричное выражение
  Англо-Русский научно-технический словарь
• CROSSING SYMMETRIC — матем. перекрёстно симметричный
  Англо-Русский научно-технический словарь
• INTERCROSS — гл.1) взаимно пересекаться 2) скрещивать(ся) (о разных породах) 3) перекрестно опылять, переопылять
  Англо-Русский словарь Tiger
• CROSS FERTILIZE — (n) перекрестно оплодотворить; перекрестно оплодотворять; перекрестно опылить; перекрестно опылять
  English-Russian Lingvistica"98 dictionary
• CROSS-FERTILIZE — v 1) бот. перекрёстно опылять 2) зоол. перекрёстно оплодотворять
  Новый большой Англо-Русский словарь - Апресян, Медникова
• CROSS-FERTILIZE — v 1> бот. перекрёстно опылять 2> зоол. перекрёстно оплодотворять
  Большой новый Англо-Русский словарь
• CROSS FERTILIZE
  
• CROSS FERTILIZE — перекрестно опылять, перекрестно оплодотворять, помогать друг другу советами
  English-Russian-dictionary - Bed release
• NONSHARED ANTIGENS — чужеродные антигены (антигены, не имеющие общих детерминант), неродственные антигены (антигены, не имеющие общих детерминант)
  Новый Англо-Русский словарь по биологии
• MAIN HISTOCOMPATIBILITY ANTIGENS — MHC-антигены, антигены главного комплекса гистосовместимости
  Новый Англо-Русский словарь по биологии
• HISTOCOMPATIBILITY ANTIGENS — H-антигены, антигены гистосовместимости
  Новый Англо-Русский словарь по биологии
• HETEROGENETIC ANTIGENS — - heterophil antigens гетерогенетические антигены, гетерофильные антигены
  Новый Англо-Русский словарь по биологии

Краевой Центр профилактики и борьбе со СПИДом и другими инфекционными заболеваниями

Кафедра клинической лабораторной диагностики ФУВ Красноярской государственной медицинской академии

"УТВЕРЖДАЮ"

Начальник Управления здравоохранения

Администрации Красноярского края

Шнайдер И.А.

"______" __________ 1999 г

СОВРЕМЕННЫЕ МЕТОДЫ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ АУТОИММУННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ

Красноярск - 1999 г.

Второе издание с изменениями и дополнениями 2002 г

^ Ольховский Игорь Алексеевич -кандидат мед. наук, зав. лабораторно-диагностическим отделом Краевого Центра СПИД, доцент кафедры КЛД ФУВ КрасГМА;

Изъюрова Ольга Юрьевна - ассистент Кафедры КЛД ФУВ КрасГМА.

Протопопова Наталья Борисовна - ассистент Кафедры КЛД ФУВ КрасГМА;

^ Шевченко Наиля Минвалеевна - кандидат биол. наук, зав. отделением СПИД и СПИД- маркерных инфекций Краевого Центра СПИД;

______________________________________________________

Необходимость разработки методических рекомендаций по лабораторной диагностики аутоиммунных заболеваний (АИЗ), в особенности на ранних стадиях болезни, определяется широким распространением этой патологии и неудовлетворительными методами лечения.

В рекомендациях кратко приведены данные об этиологии, основных звеньях патогенеза АИЗ, дана классификация АИЗ. Кратко изложены также данные о клинических проявлениях ряда диффузных поражений соединительной ткани.

Основное внимание в рекомендациях уделяется методам серодиагностики АИЗ. Удачно составленные таблицы, наглядно демонстрируют достоинства определения аутоантител к тем или иным антигенам для решения вопросов верификации диагноза, прогноза течения болезни, выявления её клинико-иммунологических субтипов. Кратко и доступно изложены некоторые методы определения серологических маркеров АИЗ.

^ Профессор кафедры клинической

иммунологии НМИ,

ВВЕДЕНИЕ:

Аутоиммунные болезни поражают 5 – 7 % населения Земли, развиваются в 3-10 раз чаще у женщин, чем у мужчин и рассматриваются как наиболее частая причина хронической патологии человека. Насчитывается более 40 нозологических форм, которые классифицируются как аутоиммунные болезни человека.

В настоящее время проблема аутоиммунизации рассматривается как общебиологическая, тесно связанная с такими проблемами как иммунные дефициты и онкогенез, а аутоиммунные процессы расцениваются не только как патологические, но и как важное звено гомеостатических реакций организма. Общепризнано, что роль иммунной системы заключается не только в защите организма от возбудителей инфекционных заболеваний и противоопухолевой защите, но и в обеспечении процесса пролиферации и дифференцировки различных тканей и органов, элиминации и утилизации отмирающих тканевых структур.

В современной литературе принято различать понятия «аутоиммунные процессы (аутоиммунизация)» и «аутоиммунные болезни».

^ 1. АУТОИММУННЫЕ ПРОЦЕССЫ

Аутоиммунные процессы – это процессы реагирования иммунной системы на нормальные (неизмененные) антигены собственных тканей – аутоантигены.

Ряд авторов полагают, что к истинным аутоантигенам не следует относить модифицированные антигены собственных тканей. Модификация их может быть следствием воздействия биологических, химических или физических факторов. Неправильно причислять к истинным аутоантигенам также интегрированные (например, за счет интеграции вирусного и клеточного генома) или комплексные антигены (за счет объединения экзо - или эндогенного гаптена с аутоантигеном). Так как модифицированные, интегрированные и комплексные антигены, по сути, являются чужеродными для организма. Вместе с тем, при определенных условиях они могут стать пусковым моментом патологических аутоиммунных изменений в организме.

Известные факты позволяют разделить все аутоиммунные процессы на гомеостатические (физиологические) и патологические (схема 1). Первая группа не имеет патогенетического значения в развитии хронического воспаления. Титры нормальных аутоантител к ДНК, белкам цитоскелета, гормонам, медиаторам и их рецепторам повышаются при стрессах, беременности, старении и при различных бактериальных и вирусных инфекциях. «Нормальные» аутоантитела не вызывают цитотоксических реакций и, вероятно, участвуют в осуществлении регуляторных и «санитарных» функций.
^

Схема 1. Классификация аутоиммунных процессов

	Аутоиммунные процессы
Гомеостатические			Патологические
Санитарные	Регуляторные
			Аутоим-мунные болезни	Болезни с аутоиммун-ными нарушениями
	Иммунной системы	Иммуно-эндокринные

^ 2. СВЕДЕНИЯ О ПАТОГЕНЕЗЕ:

Патологические аутоиммунные процессы развиваются на основе физиологических, а не являются принципиально новыми реакциями. По-видимому, неадекватной деятельностью «санитарных» аутоиммунных процессов вызваны такие органонеспецифических заболеваний, как СКВ, полимиозит, первичный билиарный цирроз и др., а также вторичные аутоиммунные поражения при ожоговой болезни, постинфарктный синдром и т.д. Вышедшие из-под контроля регуляторные аутоиммунные процессы, очевидно, приводят к развитию органоспецифических аутоиммунных заболеваний: аутоиммунные гемоцитопении, эндокринопатии и др.

Основные типы аутоиммунных процессов могут быть связаны с:

• 
  ответом на аутоантигены, естественная толерантность к которым отсутствует (слабая экспрессия, недоступность для лимфоцитов или отсутствие их презентации Ja+ A-клетками;
• 
  обходом имеющейся аутотолерантности путем кооперации Т-хелперов, реагирующим на "чужое", с В- клетками, реагирующими на аутоантигены;
• 
  истинная отмена толерантности к аутоантигенам

• 
  Комплемент- зависимый цитолиз;
• 
  Индукция антителозависимой клеточной цитотоксичности;
• 
  Взаимодействие с клеточными рецепторами для естественных лигандов (активация или блокада действия эндогенных регуляторов);
• 
  Изменение функциональной активности клеток различных органов и тканей;
• 
  Индукция апоптоза (запрограмированной клеточной смерти);
• 
  Иммунокомплексные реакции (нарушение клиренса и отложение комплексов в тканях, прежде всего в сосудах микроциркулярного русла).

Существует ряд концепций механизма развития патологических аутоиммунных процессов, в которых на первый план выдвигаются изменения либо клеток (органов) - мишеней, либо первичные сдвиги в самой иммунной системе.

Сторонники первой группы концепций придают большое значение избыточному повышению концентрации аутоантигенов, циркулирующих в крови и находящихся на клеточных мембранах, а также демаскировке внутриклеточных антигенов. Предполагается важная роль утраты толерантности к антигенам «забарьерных» тканей: антигенам миелина нервной системы, передней камеры глаза и т.д. Существенная роль в патогенезе системной красной волчанки (СКВ) отводится нарушениям элиминации аутоантигенов и утилизации иммунных комплексов макрофагальной системой. Обсуждается роль нарушений экспрессии аутоантигенов клеточных мембран в патогенезе аутоиммунных болезней щитовидной железы, сахарного диабета 1 типа, первичного билиарного цирроза. Клетки- мишени при этих заболеваниях несут на мембране антигены II класса системы HLA, их экспрессия увеличивается под влиянием вирусов, и поэтому эти клетки способны представлять антиген без участия макрофагов. Все больше подтверждения находит концепция перекрестно-реагирующих антигенов (таблица 1).
^

Таблица 1. Перекрестно реагирующие антигены

Ряд патогенных микроорганизмов, таких как микоплазмы, гемолитический стрептококк, стафилококк, некоторые вирусы способны выделять так называемые суперантигены - иммуногенные белки способные связываться без предварительного захвата макрофагами с молекулами HLA 1 или 2 класса и стимулировать «запрещенные» аутореактивные клоны Т- лимфоцитов.

Дисфункции самой иммунной системы с избыточным реагированием на ауто- и перекрестно реагирующие антигены придается не меньшее значение. Исключительное место принадлежит концепции F. Burnet, отводящей ключевую роль мутациям лимфоцитов с нарушением элиминации возникающих аутоагрессивных клонов. В настоящее время аутоиммунные болезни рассматриваются ни как гиперфункция иммунной системы, а как её дисфункция, связанная с недостаточностью регуляторных механизмов, т.е. как своеобразный иммунный дефицит. Имеет значение генетически детерминированный высокий и низкий иммунный ответ на определенные антигены. При низком ответе на один антиген и высоком - на другие создаются условия для персистенции микроорганизмов в тканях, появления комплексных и модифицированных антигенов, истощение супрессорных механизмов.

Иммунокомпетентные клетки могут стать мишенью для вирусной атаки. Результатом является нарушение их функциональной активности, цитотоксический эффект, либо поликлональная активация лимфоцитов (например: при инфицировании вирусом Эпштейн - Барр), приводящая к нарушению иммунорегуляции и появлению избытка аутоантител.

^ 3. АУТОИММУННЫЕ ЗАБОЛЕВАНИЯ

Заболевания, в патогенезе которых патологические аутоиммунные процессы играют ведущую роль определяются как аутоиммунные болезни. В целом, развитие аутоиммунных заболеваний включает три основных группы факторов: предрасполагающие, инициирующие и способствующие (табл. 2).

Среди предрасполагающих факторов основное значение имеют генетические особенности (табл. 3). За исключением анкилозирующего спондилоартрита и близких состояний, связанных с носительством HLA –B27, все остальные аутоиммунные заболевания ассоциируются с определенными гаплотипами HLA класса 2 или молекулами главного комплекса гистосовместимости класса 3.
^

Таблица 2. Патогенез аутоиммунных болезней

Так, 80 – 90 % больных ревматоидным артритом являются носителями HLA – DR1 или одного из вариантов HLA DR4 (DW4, DW14, DW15). Дефект гена, контролирующего синтез С4 компонента комплемента обнаруживается у 50 – 80 % больных СКВ.

Таблица 3. Роль генетических факторов в развитии аутоиммунных болезней.

^ 4. КЛАССИФИКАЦИЯ АУТОИММУННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ

Классификация аутоиммунных заболеваний до сих пор остается весьма трудной и спорной проблемой. Большинство авторов делят аутоиммунные болезни в зависимости от характера аутоантигена, механизмов аутоиммунизации, степени доказанности её роли в патогенезе заболевания. Принято различать болезни, аутоиммунных характер которых не вызывает сомнений: СКВ, Ревматоидный артрит, аутоиммунные гемоцитопении, эндокринопатии, коагулопатии, ряд болезней ЦНС и глаз и др.); наиболее вероятен (первичный билиарный цирроз, узелковый периартериит, склеродермия, полимиозит и т.д.); лишь предполагается (дислипопротеидемии, эпилепсия, шизофрения, паркинсонизм и др.). Особо выделяют антительные болезни рецепторов (тиреотоксикоз, сахарный диабет 2 тип, миастения гравис, рассеяный склероз и др.). Выделяют аутоиммунные болезни с аутоиммунизацией, как основным фактором патогенеза (первичные) и заболевания с вторичными аутоиммунными нарушениями. Основной рабочей классификацией является деление на органоспецифические и органонеспецифические аутоиммунные заболевания. Более подробная классификация (цит. по Ширинскому В.С., 1997г) включает 5 классов: А - Е (схема 2).

Достаточно большие трудности возникают при дифференциальной диагностики ранних проявлений основных, так называемых, "Больших коллагенозах" - системных заболеваниях соединительной ткани с вовлечением в патологический процесс различных органов и систем. К этим заболеваниям относят: системную красную волчанку, прогрессирующий системный склероз, ревматоидный артрит, синдром Шегрена и группу смешанных заболеваний соединительной ткани.

^ Схема 2. Классификация аутоиммунных заболеваний.

Схема 2. Классификация аутоиммунных заболеваний (Ширинский В.С., 1997г).

КЛАСС: А (первичные аутоиммунные болезни с генетической и без генетической предрасположенности)

"Органоспецифические" «Промежуточные» "Органонеспецифические" Аутоиммунные заболевания

крови

тереоидит Хашимото пемфигус, пемфигоид системная красная волчанка аутоиммунная гемолитическая первичная микседема первичный билиарный цирроз ревматоидный артрит анемия

тиреотоксикоз печени дерматомиозит аутоиммунная тромбоцитопения

атрофический гастрит хронический активный гепатит системная склеродермия аутоиммунная нейтропения

адреналит синдром Шегрена смешанное заболевание гранулематоз Вегенера

некоторые формы язвенный колит соединительной ткани первичного бесплодия глютеновая энтеропатия рецидивирующий полихондрит инсулинозависимый синдром Гудласчера

диабет 1 типа

варианты гиперлипопротеидемий

Миастения гравис

КЛАСС: В (вторичные аутоиммунные болезни с генетической и без генетической предрасположенности)

Ревматизм, болезнь Чагаса

Постинфарктный и посткардиотомный синдромы

Лекарственные аутоиммунные реакции

Анкилозирующий спондилоартрит

Эндогенный увеит

Дилятационная кардиомиопатия

^ КЛАСС: С (болезни с генетическими дефектами комплемента)

Ангионевротический отек

Волчаночно-подобные синдромы

КЛАСС: Д (медленная вирусная инфекция)

Рассеянный склероз

Поствакцинальные реакции

КЛАСС: Е - сочетание заболеваний классов А - Д

^ 5. ОСНОВНЫЕ СИСТЕМНЫЕ ЗАБОЛЕВАНИЯ

Системная красная волчанка

Системная красная волчанка (СКВ) - мультисистемное заболевание, возникающее на фоне многочисленных иммунных нарушений - продукции аутоантител, гипергаммаглобулинемии, патологии Т-лимфоцитов -супрессоров, снижения содержания сывороточных комплементарных белков, и повышения уровня ЦИК, играющих, как полагают, основную роль в патогенезе СКВ.

С достаточной долей уверенности можно говорить о нарушении функционирования Fc -IgG и C3b- рецепторов, ответственных за фагоцитоз ЦИК. Вместе с тем, не все появляющиеся в крови больных СКВ аутоантитела и иммунные комплексы являются равнозначными по патогенности. Некоторые аутоантитела вызывают патологические симптомы вследствие своей антигенной специфичности (к поверхностным антигенам эритроцитов или факторам свертывания). Действие других обусловлено изотипом иммуноглобулина, способностью фиксировать комплемент, их авидностью к тканям и т.д.

Несомненно участие половых гормонов в патогенезе СКВ. Эстрогены усиливают, а андрогены тормозят выработку аутоантител. У больных СКВ отмечают повышенное образование 16- альфагидроксиэстрона, что вызывает пролонгированную стимуляцию эстрогенов.

Клинические проявления болезни зависят от того, какая популяция аутоантител и ЦИК присутствуют в данный момент у конкретного больного, какие органы, клетки или клеточные продукты служат мишенями для них, а также от способности больного корригировать эти нарушения. Около 72% больных выживают более 10 лет после начала заболевания. Ведущими причинами инвалидизации и смертности являются инфекционные осложнения и почечная недостаточность.

Основные лабораторные критерии диагностики и мониторинга представлены в таблице 4:

Антитела к Sm- антигену высокоспецифичны для СКВ), однако их уровень не отражает тяжесть заболевания. Вместе с тем, клинически с присутствием антител к Sm чаще связаны поражения нервной системы и волчаночные психозы, но в то же время характерна относительная сохранность функции почек. Антитела к Sm выявляются у 25 –30% (РИФ –метод) и 50 – 60 % (метод ИФА) больных. Негативные результаты теста на антитела к SM не исключают заболевания. Концентрация антител к Sm- антигену существенно не меняется на фоне терапии и поэтому их количественный мониторинг не имеет практического смысла. Присутствие антител к Sm –антигену входит в критерии СКВ, принятые Американской ревматологической ассоциацией.

Уровень антител к нативной (двухспиральной) ДНК в отличии от антител к Sm отражает риск и тяжесть волчаночного нефрита и используется в качестве критерия эффективности терапии СКВ. Дополнительным лабораторным критерием служит снижение уровня С3 и С4 компонентов комплемента, что также коррелирует с активностью люпус- нефрита.

Приблизительно 80% всех больных СКВ имеют антитела к гистонам. Очень часто эти антитела обнаруживаются у пациентов с лекарственной красной волчанкой (ЛКВ). Однако при ЛКВ отсутствуют антитела к нативной ДНК. Следовательно, одновременное определение антител к гистонам и dsDNA позволяет проводить дифференциальную диагностику между СКВ и ЛКВ. Кроме того, антитела к гистонам можно обнаружить у пациентов с первичным билиарным цирозом, ревматоидным артритом и склеродермией.

Прогрессирующий системный склероз (Системная склеродермия)

ПСС - это мультисистемное заболевание, характеризующееся воспалительными, васкулярными и фиброзными изменениями в коже (склеродермия) и в различных внутренних органах, особенно в желудочно-кишечном тракте, легких, сердце и почках. Характер течения, степень распространенности по организму, тяжесть проявления заболевания существенно различаются у разных больных. В ряде случаев висцеральные проявления могут иметь место и без видимых кожных проявлений.

Этиология заболевания неизвестна, роль наследственных факторов неоднозначна. Заболевают обычно лица в возрасте 30 - 40 лет, женщины в 4 раза чаще, чем мужчины.

ПСС сопровождается нарушениями гуморального и клеточного иммунитета. в крови у больных часто обнаруживают гипергаммаглобулинэмию и антитнуклеарные антитела, антитела к клеточным мембранам фибробластов и к коллагену 1 и 4 типов.

Клинические проявления как правило (у 90% больных) начинаются с феномена Рейно - эпизодической вазоконстрикции артерий и артериол пальцев рук, стоп, иногда кожи лица, наступающей в результате действия холода или эмоционального стресса. Пораженные участки кожи вначале бледнеют, затем становятся цианотичными и затем краснеют. Прогноз заболевания определяется вовлеченностью в процесс миокарда, легочной гипертензией и почечной недостаточностью.

Сосуществование кальциноза кожи, феномена Рейно, гипокинезии пищевода, склеродактилии и телеангиэктазии получило название “CREST” - синдрома и оценивается как относительно доброкачественный вариант ПСС.

Лабораторные данные при ПСС зависят от стадии и активности патологического процесса, часто повышена СОЭ, у 50% больных отмечается гипергаммаглобулинемия в основном за счет IgG, низкий титр ревматоидного фактора выявляется у 25% , ANA - практически у 96% страдающих ПСС. Специфические аутоантитела: к ядерному рибонуклеопротеиду (РНП), белкам центромер и анти Scl-70. Вместе с тем, самый специфичный маркер анти Scl-70- встречается только в 20 % случаев ПСС. Антитела, реагирующие с центромерной областью метафазных хромосом, обнаруживаются у большинства больных, соответствующим группе “CREST ”-синдрома. Поэтому, если определение антител к Scl-70 при ПСС служит плохим прогностическим признаком, то выявление антицентромерных антител, напротив свидетельствует о более благоприятном течении заболевания.

Ревматоидный артрит

Ревматоидный артирит (РА) - хроническое полисистемное заболевание неизвестной этиологии, при котором наряду с разнообразными системными проявлениями, патогмоничным является персестирующий воспалительный синовиит, симметрично поражающий периферические суставы. Течение заболевания отличается большой вариабельностью, как правило, с волнообразным течением.

Специфических лабораторных тестов для диагностики РА не существует. Однако, ревматоидные факторы, которые являются аутоантителами, реагирующими с IgG, обнаруживаются у 60% больных. Сами ревматоидные факторы могут относится к классам: IgA, IgM или IgG. Частота выявления ревматоидных факторов среди здоровых лиц достигает 5% и увеличивается с возрастом. Кроме того, ревматоидный фактор может присутствовать при многих заболеваниях - СКВ, Синдром Шегрена, хронических заболеваниях печени, гепатите В, туберкулезе, сифилисе и т.д. В связи с этим, обнаружение ревматоидных факторов не устанавливает диагноз, но имеет определенное прогностическое значение, так как больные с его высоким титром (особенно IgM и IgA) имеет тенденцию к более тяжелому и прогрессирующему течению заболевания. Эозинофилия у больных РА указывает на тяжесть системных проявлений. Почти у всех больных наблюдается повышение СОЭ, СРБ, церулоплазмина, других белков острой фазы. Как правило, это коррелирует с активностью заболевания и указывает на прогрессирование повреждения суставов.

Смешанные заболевания соединительной ткани.

Смешанные заболевания соединительной ткани (СБСТк) - это синдром, характеризующийся различным сочетанием клинических проявлений, аналогичных тем, которые наблюдаются при СКВ, склеродермии, полимиозите и ревматоидном артрите на фоне необычно высоких титров циркулирующих аутоантител к антигену ядерных рибонуклеопротеидов (РНП). При этом наблюдается отсутствие либо весьма низкий титр антител к другим экстрагируемым ядерным антигенам и к ДНК. Кроме Анти- РНП, отмечается выраженная поликлональная гипергаммаглобулинемия, снижение компонентов комплемента, дефектность супрессорного звена Т-лимфоцитов, наличие ЦИК, отложение иммунных комплексов по ходу мембран сарколеммы и гломерулярных базальных мембран, лимфоцитарная и плазмоцитоклеточная инфильтрация многих тканей. Одним из основных проявлений СБСТк является пролиферативное поражение интимы и медии кровеносных сосудов, приводящее к их сужению. Именно поражение крупных и мелких сосудов питающих жизненно важные органы и определяет течение и прогноз данного заболевания. У некоторых больных имеются признаки нескольких аутоиммунных заболеваний, но в отличии от больных СБСТк, отсутствуют антитела к РНП. В этом случае, если имеющиеся признаки удовлетворяют сразу нескольким аутоиммунным заболеваниям, ставят диагноз «перекрестного синдрома», если нет – диагноз «недифференцированного заболевания соединительной ткани».

Синдром Шегрена

Синдром Шегрена (СШ) или “сухой” синдром - иммунологическая патология, характеризующаяся прогрессирующей деструкцией экзокринных желез, и сопровождающаяся разнообразными аутоиммунными нарушениями. Заболевание может возникнуть само по себе (первичный СШ), или на фоне других аутоиммунных аномалий (вторичный СШ). Кроме того, СШ подразделяют на гландулярную форму, когда клинические проявления ограничиваются системой экзокринных желез, и экстрагландулярную, когда в патологический процесс вовлечены и другие ткани.

Основные механизмы повреждения при СШ это лимфоцитарная инфильтрация и отложение иммунных комплексов. Примерно в 10 % случаев СШ развивается лимфопролиферативный процесс, получивший название псевдолимфома. У некоторых больных в дальнейшем развивается истинная неходжкинская лимфома. Довольно часто наблюдается аутоиммунное поражение щитовидной железы по типу тиреоидита Хашимото.

Кроме сухости слизистых оболочек (керотоконьюктивит, ксеростомия) у больных с СШ развиваются васкулиты, полиневропатия, интерстициальная пневмония, гломерулонефрит. В целом же, в сравнении с другими коллагенозами, прогноз для больных СШ может считаться вполне благоприятным.

При лабораторных исследованиях обращают внимание на повышение уровня ЦИК, лейкопению, тромбоцитоз, ускоренное СОЭ. Регистрируется позитивная реакция на ANA. Аутоантитела в основном представлены ревматоидным фактором, SSA (анти-Ro), SSB (анти-La). Большинство больных с наиболее серьезными системными проявлениями SSA-позитивны. У беременных наличие SSA значительно повышают риск рождения младенцев с нарушениями сердечной проводимости.

Полимиозиты и дерматомиозиты

Дерматомиозиты - системное заболевание соединительной ткани, при котором преимущественно поражается кожа и мышечная ткань. Разнообразные поражения кожи с патогмоничным периорбитальным отеком с пурпурно-лиловой эритемой сочетаются с миастеническим синдромом, миокардиодистрофией, полиартритом и присоединяющимся воспалением легких (гиповентиляционного и аспирационного генеза). Особого внимания заслуживает высокая частота сочетания дерматомиозита со злокачественными опухолями. Полимиозиты - системные воспалительные миопатии без существенного поражения кожи, представляющие группу заболеваний, характеризующиеся диффузным поражением мускулатуры вследствие периваскулярной и интерстициальной инфильтрации мышечной ткани воспалительными клетками, преимущественно лейкоцитами.

^ 6. АУТОАНТИТЕЛА КАК СЕРОЛОГИЧЕСКИЕ МАРКЕРЫ СИСТЕМНЫХ КОЛЛАГЕНОЗОВ.

Впервые проявления специфического LE- феномена было зарегистрировано в 1948 г в процессе инкубации сывороток различных пациентов со взвесью лейкоцитов нормальных доноров. Годом позже был идентифицирован сывороточный иммуноглобулин, осуществляющий антинуклеарную реакцию, лежащую в основе LE-феномена. Определение LE- клеток доминировало в 50- 70 годы как основная реакция выявления антинуклеарных антител (ANA).

В 80-х годах для выявления ANA был предложен метод непрямой иммунофлуоресценции, с тестированием сыворотки пациентов на срезах тканей почек и печени кролика (мыши), либо на культуре раковых эпителиоидных клеток человека (Hep-2). Метод зарекомендовал себя как высокочувствительный и специфичный, позволяющий регистрировать одновременное присутствие аутоантител к почти 40 отдельным ядерным антигенам. Особенности характера распределения специфического свечения при учете реакции (гомогенное, крапчатое, периферическое, связанное с ядрышками или с центромерами, наличие цитоплазматических связывающих фокусов) позволяет в первом исследовании определить основную антигенную специфичность выявляемых аутоантител. К недостаткам данного метода следует отнести относительную трудоемкость, зависимость от оптических характеристик люминисцентного микроскопа, а также проблемы стандартизации и контроля качества, в основном связанные с использованием тканей животных или клеточных культур.

Одновременное развитие получил метод использования твердофазного ИФА как для выявления суммарного комплекса антинуклеарных аутоантител (ANA- скрининг), так и для выявления отдельных аутоантител к экстрагируемым ядерным антигенам (ENA-скрининг и ENA-профиль). Достоинствами метода являются возможность автоматизации и высокая производительность. Чувствительность и специфичность сравнима с РНИФ, правда использование в некоторых тест-системах рекомбинантных антигенов потенциально может вызывать ложно положительные результаты при тестировании сывороток с высоким титром антибактериальных антител.

Другие известные методы идентификации аутоантител к ENA - иммунодиффузия в геле, иммуноэлектрофорез, гемагглютинация, иммунопреципитация и иммуноблотинг широкого применения в практике клинической лаборатории пока не получили.

Перечень наиболее важных аутоантител к экстрагируемым ядерным антигенам представлены в таблице 5:

Таблица 5. Основные серологические маркеры аутоиммунных заболеваний

Таблица 6

Определение ANA в реакции непрямой иммунофлуоресценции

При осуществлении типичного теста, сыворотку пациента инкубируют с антигенными субстратами (ткань печени или почек животных, культура клеток Hep-2) для осуществления специфического связывания имеющихся в сыворотке антител с клеточными ядрами клеток. После отмывания несвязавщихся белков сыворотки, субстрат инкубируют с антителами против человеческих иммуноглобулинов. Поскольку вносимые антитела коньюгированы с флуоресцирующим веществом, при наличии в сыворотке антител к ядерным антигенам образовавшийся комплекс (ядерный антиген + антиядерные антитела сыворотки + антитела к антителам человека + флюоресцирующее вещество) можно выявить при люминесцентной микроскопии. Характер свечения - периферический, диффузный, крапчатый и т.д. позволяет выявить связь с конкретными внутриядерными структурами см. Таблицу 7:

Таблица 7. Оценка результатов определения ANA в реакции непрямой иммунофлуоресценции.

Определение ANA и ENA методом твердофазного ИФА

Тест-система для ИФА ANA (UBI MAGIWELL) - для скринингового анализа на антиядерные антитела обеспечивает полуколичественное определение широкого спектра антител к сорбированному в лунках комплексу различных клеточных ядерных антигенов: двухспиральной и одноцепочечной ДНК, гистонам, рибонуклеопротеинам (РНП), SS-A, SS-B, Sm и др.

Отличительной особенностью систем ИФА ENA- скрининг и ENA- профиль (CLARK LABORATORIES) является то, что на поверхности полистерольных лунок сорбированы предварительно высокоочищенные отдельные эксрагируемые ядерные антигены: SS-A, SS-B , Sm, Sm/РНП, Scl-70 и Jo-1. В скрининговом варианте - все 6 антигенов вместе, в профильном - каждый антиген в отдельной лунке. Таким образом, обычный алгоритм диагностики заключается в первичном анализе сыворотки на скрининговой системе и повторной постановке анализа положительных сывороток на тест-системе ENA - профиль для выявления антител к конкретным антигенам. В случае положительного теста на скрининговой ANA -системе и отрицательного результата в тест-системах ENA - необходимо тестирование сыворотки на тест-системах для изолированного определения антител к ДНК, гистонам и другим антигенам, отсутствующим в системах ENA.

В случае установленного диагноза и выявленным ранее аутоантителам - для мониторинга эффективности терапии используются тест -системы для количественного определения титра антител к отдельным антигенам.

В качестве альтернативы плашечным тест- системам можно использовать пробирочные ИФА тесты фирм "ROCHE" и "Sanofi".

Положительные результаты серологического тестирования на ANA и ENA могут наблюдаться у 1 - 5 % здоровых лиц, особенно в пожилом возрасте. Определенные лекарства, например такие, как р-аминосалициловая кислота, фенитион, изониазид, гидразин, прокаинамид и некоторые другие могут индуцировать образование антиядерных антител.

^ 7. АУТОАНТИТЕЛА В ДИАГНОСТИКЕ СИСТЕМНЫХ ВАСКУЛИТОВ

Системные васкулиты – группа заболеваний, которые характеризуются хроническим воспалением и деструкцией стенок кровеносных сосудов. Этиологические факторы выполняющие тригерную роль включают: инфекционные агенты, медикаментозные препараты, опухолевую прогрессию, циркуляцию патологических белков и ЦИКов, аутоантитела. Вместе с тем, около половины всех случаев системных васкулитов не имеют явной этиологической обусловленности и расцениваются как «идиопатические». Важно помнить, что некоторые васкулиты со сходными клиническими проявлениями могут иметь существенно различный прогноз и требовать различных терапевтических подходов.

До сих пор, окончательно не отработаны классификационные схемы данной группы заболеваний. Последние классификации базируются на калибре преимущественно поражаемых сосудов и преобладающему в очаге деструкции типу клеточных элементов: нейтрофилов, моноцитов или лимфоцитов. Правда, это скорее отражает стадию процесса, нежели доминирующий патогенетический процесс.

Появление возможности определения аутоантител к нейтрофильным цитоплазматическим антигенам (ANCA ) значительно улучшило диагностику этих заболеваний. Существуют два подкласса аутоантител к нейтрофилам человека: c-ANCA (цитоплазматические ANCA) и p-ANCA (перинуклеарные ANCA). Наиболее значимыми являются антитела к ферментам первичных гранул нейтрофилов: протеиназе-3 (PR3) и миелопероксидазе (МРО), соответственно. Определение спектра ANCA (PR3, MPO) позволяет проводить дифференциальную диагностику грануломатоза Вегенера и микроскопического полиартериита. Использование ANCA как показателя активности васкулита имеет определенные преимущества перед такими классическими показателями как СОЭ и СРБ, более адекватно отражая степень активности и эффективность проводимой терапии и независимо от присоединения инфекционных осложнений.

Таблица 8. Диагностическая значимость выявления различных противонейтрофильных (ANCA) –антител

^ 8. ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА АНТИФОСФОЛИПИДНОГО СИНДРОМА

Антитела к фосфолипидам представляют собой гетерогенную группу аутоантител против отрицательно заряженных фосфолипидов. Они обнаруживается, в первую очередь, в тесте, определяющем антитела против кардиолипина (АСА-тест), дают ложноположительные реакции в биологических тестах на сифилис и в антикоагулянтном тесте на волчанку. Все эти три теста обнаруживают схожие, но необязательно идентичные антитела. Таким образом, для того, чтобы идентифицировать антитела к фосфолипидам, иногда приходятся использовать все перечисленные тесты.

Из различных существующих методов анализа для определения антител к фосфолипидам наиболее чувствительным является твердофазный иммуноферментный метод определения антител к кардиолипину. Присутствие этих антител у пациентов помогает выявлять больных с риском венозного и/или артериального тромбоза, часто сопровождающегося тромбоцитопенией.

Термин антифосфолипидный синдром был предложен для обозначения группы заболеваний, сопровождающихся повышенным количеством аутоантител к фосфолипидам и подразделяется на первичный (не связанный с определенной аутоиммунной патологией) и вторичный, асоциированный с СКВ или другими аутоимунными болезнями.

Антифосфолипидный синдром наиболее часто проявляется у пациентов с системной красной волчанкой или у больных волчанко-подобными заболеваниями, где критерии системной красной волчанки не выполняются. Высокие уровни антител к кардиолипину наблюдаются при тромбозах, при потере плода, при тромбоцитопении и некоторых других заболеваниях. Низкие уровни антител к кардиолипиду были найдены при различных клинических нарушениях, не относящихся к антифосфолипидному синдрому. Поэтому низкие уровни этих антител имеют ограниченное диагностическое значение.

Антифосфолипидный синдром связан более четко с антителами к кардиолипину классов IgG и IgA, чем с антителами класса IgM. Однако, при лечении наибольшим образом изменяется уровень lgM-антител. Низкие уровни антител класса IgM можно наблюдать и при других аутоиммунных заболеваниях, таких как ревматоидные артриты, первичный синдром Шенгрена, системная волчанка, вызванная применением лекарств, болезнь Лайма и сифилис.

Тест-система ImmuLisa™ ACA-Screen EUSA является удобным инструментом для предварительного выявления тех пациентов, в крови которых содержатся АСА. Последующий анализ позитивных сывороток с помощью наборов ImmuUsa™ ACA-IgG, ImmuUsa™ ACA-lgA, ImmuUsa™ ACA"IgM позволяет определить индивидуальные изотипы этих аутоантител.

Таблица 9. Синдромы, связанные с АСА

Как показали проведенные исследования у пациентов с антифосфолипидным синдромом огромное значение имеет наличие антител не только к кардиолипину (АСА), но и к фосфатидилсерину, последние могут обнаруживаться как совместно с АСА, так и отдельно.

При СКВ АСА достаточно хорошо связываются и с фосфатидилсерином, в то время как некоторых инфекционных заболеваниях, АСА высокоспецифичны к кардиолипину. В связи с этим, определение отдельно антител к фосфатидилсерину является важным диагностическим критерием вторичного антифосфолипидного синдрома.

Показания для исследования на антифосфолипидный синдром:

• 
  тромбозы и васкулиты при аутоиммунных заболеваниях (оценка тяжести состояния, прогноз и мониторинг терапии)
• 
  частое прерывание беременности или внутриматочная гибель плода (возможность результативной профилактики в течение новой беременности)
• 
  неясные неврологические проявления (хорея, мигрень, эпилепсия могут быть вызваны микротромбозами)
• 
  рецидивирующая тромбоцитопения неясного генеза (уточнение диагноза)
• 
  мраморная кожа

Некоторые эндокринные заболевания сопровождаются появлением аутоантител, которые, в ряде случаев играют существенную роль в их патогенезе. К числу таких заболеваний относятся: инсулин- зависимый диабет 1 типа, тиреоидит Хашимото, болезнь Грейвса, узелковый тиреоидит, синдром "кандидоза- эндокринопатии" и тд.

Определение антител к - клеткам островков Лангерганса поджелудочной железы.

Известно, что ключевым моментом в развитии инсулинзависимого сахарного диабета 1 типа является феномен превращения - клеток из "своего" в "не свое" и активацией их аутоиммунного поражения. При медленном течении болезни самым ранним признаком патологии служит появление антител к - клеткам островков Лангерганса поджелудочной железы и, конкретно, к мембраносвязанной декарбоксилазе глутаминовой кислоты в период, когда уровень сахара в крови еще не превышает нормы, а толерантность к глюкозе остается нормальной. Поскольку первые клинические проявления диабета проявляются при поражении более 90% всех инсулин -синтезирующих клеток, антитела могут появляться за много лет (до 8 лет) до клинической манифестации болезни. Вместе с тем, присутствие антител к - клеткам коррелирует с их остаточным количеством и по мере гибели оставшихся - клеток снижается стимул к аутоиммунному ответу титр аутоантител может существенно снижаться вплоть до неопределяемых значений. Как правило, при обследовании лиц, страдающих диабетом 1 типа антитела к островковым клеткам выявляются в 50 - 80 % случаев. Частота встречаемости этих аутоатител у родственников (1-ой степени) диабетиков достигает 2 - 5 %. Известно, что ежегодно у 11% этой группы людей возникают симптомы диабета.

Определение антител к - клеткам островков Лангерганса поджелудочной железы проводится как методом непрямой иммунофлуоресценции, так и методом твердофазного ИФА. В первом случае в качестве субстрата используются срезы поджелудочной железы обезьян, во втором- в лунках планшета сорбируются очищенные антигены островковых клеток. Гемолиз, липемия и микробная контаминация препятствуют проведению анализа. Сыворотки, содержащие большую концентрацию ANA затрудняют определение, особенно при проведении РНИФ.

Определение аутоантител против антигенов щитовидной железы

ТПО является антигенным компонентом тиреоидного микросомального антигена и представляет собой слабо гликозилированный гемсодержащий белок, играющий важную роль в процессе иодирования тиреоглобулина и синтезе тиреоидных гормонов. Антитела к ТПО присутствуют в сыворотке пациентов с зобным и атрофическим тиреоидитом или первичным тиреотоксикозом. Наиболее высокие концентрации присутствуют у больных с фиброзным или оксифильным вариантом зоба Хашимото. У пациентов с болезнью Грейвса (Базедова болезнь) образуются оба типа антител, но в достаточно низких концентрациях. Высокие концентрации антител к ТГ характерны для сывороток пациентов с гипофункцией щитовидной железы, фиброзным зобом Хашимото, миксидемой. Антитиреоидные антитела более характерны для аутоиммунных заболеваний щитовидной железы, в этих случаях титры аутоантител выше.

Таблица 10. Частота (%) встречаемости антитиреоидных аутоантител

^ 10. СЕРОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА АУТОИММУННЫХ ПОРАЖЕНИЙ ПЕЧЕНИ

Согласно современной классификации хронического гепатита аутоиммунный гепатит (АИГ) определяется как неразрешившийся, преимущественно перипортальный гепатит с наличием гипергаммаглобулинэмии и тканевых аутоантител, в большинстве случаев регрессирующий под влиянием иммуносупрессивной терапии. В настоящее время в группу аутоиммунных болезней печени, наряду с аутоиммунным гепатитом включены первичный билиарный цирроз (поражение мелких желчных протоков с наличием антимитохондриальных антител (АМА) ), аутоиммунный холангит (поражение мелких протоков в отсутствии АМА), первичный склерозирующий холангит (поражение крупных желчных протоков).

Патогенез АИГ изучен недостаточно. Известно, что в развитии хронического гепатита этиологии главную роль играет иммунная система. Установлено, что сывороточные аутоантитела достаточно часто обнаруживаются при хронических гепатитах любой этиологии (табл.11). Для ANA, обнаруживаемых при АИГ и других заболеваниях печени не удалось выявить специфических нуклеарных антигенов и подтипа ANA. Мишенями для аутоиммунных процессов при хронических заболеваниях печени различной этиологии (АИГ, гепатит в рамках аутоиммунного полиэндокринного синдрома 1-типа, аутоиммунитет, индуцированный гепатотропными вирусами, лекарственных гепатит) являются ферменты метаболизма ксенобиотиков 1 фазы (цитохром Р-450) и II- фазы (уридин дифосфат глюкоронозил трансфераза - UGT).

Таблица 11. Аутоантитела, обнаруживаемые при различной этиологии хронических гепатитов.

АИГ 1-го типа (наличие сывороточных ANA, SMA, антител к актину) составляет 85% всех с АИГ. Наблюдается преимущественно у женщин (8:1). Поражает лиц старшего возраста, характеризуется менее частыми внепеченочными проявлениями и относительно благополучным прогнозом. АИГ- 2-го типа (наличие сывороточных LKM-1) составляет не более 15 % всех случаев АИГ, среди которых преобладают лица молодого возраста (от 2 до 14 лет). Часто сопровождается системными проявлениями и неблагоприятным прогнозом.

АИГ- 3-го типа (наличие SLA) чаще развивается у молодых женщин (90%) и по мнению ряда автором представляет собой один из вариантов АИГ 1-го типа.

1. 
   ЗАКЛЮЧЕНИЕ

^ СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

1. 
   Ширинский В.С. "Аутоиммунные заболевания: патогенез, диагностика, принципы лечения", Методическое пособие для студентов и врачей, Новосибирск, 1997 г
2. 
   Серов В.В., Зайратьянц О.В. "Аутоиммунизация и аутоиммунные болезни", Архив патологии, 1992 г., т.54, стр. 5-11
3. 
   Апросина З.Г., Серов В.В. "Аутоиммунный гепатит (история изучения, современные аспекты)", Архив патологии, 1998 г., т.60,№3, стр.71-75.
4. 
   Покровский В.И., Гордиенко С.П. "Иммунология инфекционного процесса", Руководство для врачей, М., 1994 г.
5. 
   Протопопов Б.В. "Основные понятия клинической иммунологии", Руководство для практических врачей, Красноярск, 1995г.
6. 
   Vijay Kamar, M.A. Janderski "Antinuclear Antibody testing", ANTIBODY, 1995, 8/CLN, P. 6, 8
7. 
   Nakamura R. M., Tan E. M. "Recent Advances in Laboratory Test and the Significance of Autoantibodies to Nuclear Antigens in Systemic Rheumatic Disease" Clin. Lab Med., 1986, 6, p. 41 - 53
8. 
   McCarty G. A., Valencia D. W., Fritzler M.J. "Antnuclear Antibodies: Contemporary Techniques and Clinical Application to Connective Tissue Disease. In: Antinuclear Antibodies. Oxford Univ. Press, N.Y., 1984, p. 1 - 95.
9. 
   Иммуноферментный анализ: наборы и оборудование, Группа компаний БиоХимМак, 2002г.
10. 
    Клиническая иммунология и аллергология, изд. Практика, М.,2000г.
11. 
    T.S. de Araujo, R.S. Kirsner “Vasculitis”, Wounds 2001,13(3) p.99-110.

1673 0

Антигенами могут быть несколько основных химических семейств.

• Углеводы (полисахариды). Полисахариды являются иммуногенными только тогда, когда они связаны с белками-носителями. Например, полисахариды, которые составляют часть более сложных молекул (гликопротеины), будут вызывать иммунную реакцию, часть которой направлена непосредственно на полисахаридную составляющую молекулы. Иммунный ответ, представленный в основном антителами, может индуцироваться против многих видов полисахаридных молекул, таких как компоненты микроорганизмов и клеток эукариоит. Прекрасным примером антигенности полисахаридов является иммунный ответ, связанный с группами крови АВО. Полисахариды в данном случае находятся на поверхности эритроцитов.
• Липиды. Липиды редко являются иммуногенными, но иммунная реакция на них может быть вызвана, если липиды конъюгированы с белками-носителям. Таким образом, липиды могут рассматриваться как гаптены. Также отмечены иммунные реакции на гликолипиды и сфинголипиды.
• Нуклеиновые кислоты. Нуклеиновые кислоты сами по себе являются слабыми иммуногенами, но становятся иммуногенными при связывании с белками-носителями. Нативная спиральная ДНК обычно не является иммуногенной у животных. Однако во многих случаях отмечались иммунные реакции на нуклеиновые кислоты. Одним из важных примеров в клинической медицине является появление антител против ДНК у больных системной красной волчанкой.
• Белки. Фактически все белки иммуногенны. Таким образом, чаще всего иммунный ответ развивается к белкам. Более того, чем выше уровень сложности белка, тем сильнее иммунный ответ на этот протеин. Размер и сложность белковых молекул определяют наличие множества эпитопов.

Связывание антигена с антигенспецифичными антителами или Т-клетками

Поскольку эти взаимодействующие силы относительно слабы, сцепка между антигеном и его комплементарным участком на рецепторе антигена должна происходить на площади, достаточно большой, чтобы произошло суммирование всех возможных взаимодействий. Это условие является основой для исключительной специфичности наблюдаемых иммунологических взаимодействий.

Перекрестная реактивность

Токсин, модифицированный до такой степени, что больше не является токсичным, но все еще сохраняет некоторые иммунохимические характеристики, называется анатоксином. Таким образом, мы можем говорить о том, что анатоксин иммунологи-чески перекрестно реагирует с токсином. Соответственно имеется возможность, иммунизируя индивидуума с помощью анатоксина, вызвать иммунный ответ к некоторым эпитопам, которые на анатоксине сохранены в том же виде, как и на токсине, поскольку не были уничтожены при модификации.

Хотя молекулы токсина и анатоксина отличаются по многим физико-химическим и биологическим характеристикам, они иммунологически перекрестно реактивны. Достаточное количество сходных эпитопов позволяет вызвать иммунный ответ на анатоксин и способствовать эффективной защите от самого токсина. Иммунологическую реакцию, в которой иммунные компоненты, будь то клетки или антитела, реагируют с двумя молекулами, имеющими одинаковые эпитопы, но отличающиеся по другим признакам, называют перекрестной реакцией.

Когда два соединения обладают перекрестной иммунологической реактивностью, они имеют один или несколько общих эпитопов, и в процессе иммунного ответа на одно из соединений будут распознаваться один или более таких же эпитопов на другом соединении с вовлечением его в реакцию. Другая форма перекрестной реактивности наблюдается в случаях, когда антитела или клетки, специфичные для одного эпитопа, связываются, обычно слабее, с другим эпитопом, который не является совершенно идентичным, но по структуре напоминает первый эпитоп.

Чтобы отметить, что антиген, используемый для иммунизации, отличен от того, против которого позднее будут реагировать произведенные иммунные компоненты, используют термины «гомологичный» и «гетерологичный». Термин «гомологичный» обозначает, что антиген и иммуноген одинаковы.

Термин «гетерологичный» указывает, что вещество, использованное для индуцирования иммунного ответа, отличается от вещества, которое позднее используется для реакции с продуктами индуцированного ответа. В последнем случае гетерологичный антиген может реагировать, а может и не реагировать с иммунными компонентами. При появлении реакции можно сделать заключение, что гетерологичный и гомологичный антигены проявляют иммунологическую перекрестную реактивность.

Несмотря на то что основным критерием в иммунологии является специфичность, иммунологическая перекрестная реактивность наблюдается на многих уровнях. Это не означает, что роль иммунологической специфичности уменьшается, а скорее указывает на то, что соединения, обладающие перекрестной реактивностью, имеют одинаковые антигенные детерминанты.

В случаях наличия перекрестной реактивности антигенные детерминанты веществ, обладающих перекрестной реактивностью, могут иметь идентичные химические структуры или состоять из одинаковых, но не идентичных физико-химических структур. В приведенном ранее примере токсин и соответствующий ему анатоксин представляют две молекулы: токсин является первоначальной молекулой, а анатоксин - модифицированной, которая обладает перекрестной реактивностью по отношению к первоначальной (нативной) молекуле.

Существуют и другие примеры иммунологической перекрестной реактивности, в которых два вещества, обладающие ею, не родственны друг другу за исключением того, что обладают одним или более общими эпитопами, точнее одним или более участками, имеющими одинаковые трехмерные характеристики. Эти вещества относят к гетерофильным антигенам. Например, антигены группы крови А человека реагируют с антисывороткой, полученной против полисахарида (тип XIV) капсулы пневмококка. Таким же образом, антигены группы крови В человека реагируют с антителами к определенным штаммам Escherichia coli. В этих примерах перекрестной реактивности антигены микроорганизмов относятся к гетерофильным антигенам (относительно антигенов групп крови).

Адъюванты

Адъюванты используются для усиления иммунной реакции на антигены уже более 70 лет. В настоящее время растет интерес к выявлению новых адъювантов для использования их при вакцинации, поскольку многие кандидаты в вакцины не обладают достаточной иммуногенностью. Это особенно важно для пептидных вакцин.

Механизм действия адъюванта включает: 1) увеличение биологического и иммунологического периода полураспада антигенов вакцины; 2) увеличение продукции местных воспалительных цитокинов; 3) улучшение доставки, процессирования антигенов и их представления (презентации) АПК особенно дендритными клетками. Эмпирически было выяснено, что адъюванты, содержащие микробные компоненты (например, экстракты микобактерий), являются лучшими. Патогенные компоненты вынуждают макрофаги и дендритные клетки экспрессировать костимулирующие молекулы и выделять цитокины.

Недавно было показано, что в такую индукцию, осуществляемую микробными компонентами, вовлекаются молекулы, распознающие структуры патогенных микроорганизмов (например, TLR 2), экспрессируемые этими клетками. Таким образом, связывание микробных компонентов с TLR дает клеткам сигнал экспрессировать костимуляторные молекулы и секретировать цитокины.

Хотя много различных адъювантов испытаны в опытах на животных (табл. 3.2) и в экспериментах на человеке, только один стал использоваться для обычной вакцинации . В настоящее время единственными адъювантами, разрешенными к использованию в патентованных вакцинах для людей в США, являются гидрат окиси алюминия и фосфат алюминия.

Как компонент неорганической соли ион алюминия связывается с протеинами, вызывая их преципитацию, что усиливает воспалительную реакцию, которая неспецифически увеличивает иммуногенность антигена. После инъекции преципитированный антиген высвобождается из места инъекции медленнее, чем обычный. Более того, если в результате преципитации размер антигена увеличится, это повысит вероятность того, что макромолекула будет подвергнута фагоцитозу.

Многие адъюванты используются в экспериментах на животных. Одним из обычно используемых адъювантов является полный адъювант Фрейнда (Freund"s complete adjuvant - FCA) , состоящий из убитых Mycobacterium tuberculosis или M.Butyricum, суспензированных в масле. В последующем из них готовится эмульсия с водным раствором антигена. Водно-масляная эмульсия, содержащая адъювант и антиген, позволяет антигену медленно и постепенно высвобождаться, продлевая воздействие иммуногена на реципиента. Другими микроорганизмами, используемыми в качестве адъювантов, являются бациллы Кальметта-Герена (БЦЖ) (аттенуированные Mycobacterium), Corynebacterium parvum и Bordetella pertusis.

В действительности многие из этих адъювантов используют способность молекул, экспрессируемых микробами, активировать иммунные клетки. К таким молекулам относят липополисахариды (ЛПС), бактериальную ДНК, содержащую неметилированные CpG динуклеотидные повторы, и бактериальные белки теплового шока. Многие из этих микробных адъювантов связывают рецепторы, распознающие структуры патогенных микроорганизмов, такие как TLR. Связывание этих рецепторов, экспрессируемых многими типами клеток врожденной иммунной системы, способствует стимуляции адаптивного ответа В- и Т-лимфоцитами. Например, дендритные клетки являются важными АПК, через которые проявляется

Таблица 3.2. Известные адъюванты и механизм их действия действие микробных адъювантов. Они отвечают секрецией цитокинов и экспрессией костимуляторных молекул, которые в свою очередь стимулируют активацию и дифференцировку антиген-специфичных Т-клеток.

Бактериальные антигены:

Группоспецифические (имеются у разных видов одного рода или семейства)

Видоспецифические (у представителей одного вида)

Типоспецифические (определяют серологический вариант внутри одного вида)

Штаммоспецифические

Стадиоспецифические

Перекрестнореагирующие антигены (сходные, одинаковые у человека и микроба)

По локализации:

О-Аг – соматический (ЛПС клеточной стенки)

Н-Аг – жгутиковый (белковой природы)

К-Аг – капсульный (ПС, белки, полипептиды)

Аг пилей (фимбриальные)

Цитоплазматические Аг (мембрана, ЦП)

Экзотоксины (белки)

Эктоферменты

О-АГ - липополисахарид клеточной стенки грамотрицательных бактерий. Состоит из полисахаридной цепочки и липида А. Полисахарид термостабилен, химически устойчив, слабая иммуногенность. Липид А - содержит глюкозамин и ЖК, онобладает сильной адьювантной, неспецифической иммуностимулирующей активностью и токсичностью. В целом ЛПС является эндотоксином. Уже в небольших дозах вызывает лихорадку из-за активации макрофагов и выделения ими ИЛ1, ФНО и других цитокинов, дегрануляцию гранулоцитов, агрегацию тромбоцитов.

Н-АГ входит в состав бактериальных жгутиков, основа его - белок флагеллин. Термолабилен.

К-АГ - это гетерогенная группа поверхностных, капсульных АГ бактерий. Они находится в капсуле. Содержат главным образом кислые полисахариды, в состав которых входят галактуроновая, глюкуроновая кислоты.

Протективные ангтигены – эпитопы экзогенных антигенов (микробов), антитела против которых обладают наиболее выраженными защитными свойствами, что предохраняет организм от повторной инфекции, используются для получения вакцин. Очищенные протективные антигены могут быть "идеальными" вакцинными препаратами.

Перекрестно-реагируюшие антигенные детерминанты встречающиеся у МО и человека/животных. У микробов различных видов и у человека встречаются общие, сходные по строению АГ. Эти явления называются антигенной мимикрией. Часто перекрестнореагируюшие антигены отражают филогенетическую общность данных представителей, иногда являются результатом случайного сходства конформации и зарядов - молекул АГ. Например, АГ Форсмана содержится в эритроцитах барана, сальмонеллах и у морских свинок. Гемолитические стрептококки группы А содержат перекрестно реагирующие АГ (в частности, М-протеин), общие с АГ эндокарда и клубочков почек человека. Такие бактериальные антигены вызывают образование антител, перекрестно реагирующих с клетками человека, что приводит к развитию ревматизма и постстрептококкового гломерулонефрита. У возбудителя сифилиса есть фосфолипиды, сходные по строению с теми, которые имеются в сердце животных и человека. Поэтому кардиолипиновый антиген сердца животных используется для выявления антител к спирохете у больных людей (реакция Вассермана).

54. В-лимфоциты: развитие, маркёры, антигенспецифический В-клеточный рецептор. Методы определения количества и функциональной активности В-лимфоцитов.

В-лимфоциты называются так потому, что они впервые выявлены у птиц в специальном центральном органе иммунитета, который называется "сумка Фабрициуса" (bursa of Fabricius) и в котором они проходят стадию созревания. У животных данный орган отсутствует, и ранние стадии созревания В-лимфоциты проходят в ККМ.

Они имеют антигенспецифический В-клеточкый рецептор (ВКР) в виде мембраносвязанных мо­лекул антител, а также ряд поверхностных CD АГ и рецепторов. В-лимфоциты могут узнавать нативный АГ в свободном состоянии.

Особенности:

составляют 10-15% лимфоцитов крови и 20-25% клеток лимфоузлов.

экспрессируют на поверхности IgD(IgM), HLA II, CD19,20,21,22,40,80/86,др.

Основная функция :

ГИО, продукция антител определенной специфичности (Ig G,A,M)

представление антигена Т-лимфоцитам

Развитие:

полипотентная стволовая клетка (СD34 и CD117)

про-В-клетки (экспрессируют АГ и стволовых клеток (СD34 и CD117), и В-лимфоцитов - СD19 и СD22))

пре-В-­клетки (начинается синтез IgM в цитоплазме)

незрелые В-клетки (экспрессируют IgM на поверхности)

2. Уничтожаются клетки, несущие рецепторы к аутоАГ.

3. Т – клеточные зоны периферич.лимфоидных органов:

уничтожаются клетки, не получившие от Т-­клеток сигнала на выживание

4. Лимфатические фолликулы:

Зрелые В-клетки (экспрессируют IgM и IgD, а также антигены СD21, СD22).

5. До встречи с АГ зрелые В-лимфоциты постоянно циркулируют в крови между ККМ и вторичными лимфоидными органами. После встречи с АГ они превращаются в плазматические клетки , продуцирующие АТ(1 млн. молекул/час), и клетки памяти.

Антигенраспознающий В-клеточный рецептор В-линфоцитов построен из молекулы мембранного иммуноглобулина (мономерные IgМ или IgD) и двух молекул CD79 (a и в). BcR имеет трансмембранные и внутрицитоплазматические сегменты, передающие внутриклеточные сигналы.

Методы определения количества и функциональной активности В-лимфоцитов.

В-лим­фоциты человека способны связывать эритроциты мыши и образовывать с ними розетки, а также формировать розетки с эритроцитами, сенсибилизированными молекулами антител (IgG) и молекулами СЗb фрагмента системы комплемента, что используется в лабораторной практике. Эти свойства совместно с экспрессией CD 5 молекул позволяют выявить субпопуляцию В-лимфоцитов.

Исследование количества и функционального состояния В-лимфоцитов В-клетки обнаруживаются в периферической крови по их рецепторному аппарату, а именно:

а) по наличию рецепторов к иммуноглобулинам и 3-ей фракции комплемента - реакция ЕАС-розеткообразования; Реакция ЕАС-розеткообразования ставится в 2 этапа: вначале

готовят реагент, состоящий из эритроцитов быка, антител к ним и комплемента, затем этот образовавшийся комплекс добавляют к лимфоцитам крови человека. Образуется розетка, которая внешне ничем не отличается от Е-розеток, но метод получения указывает на выявление именно В-лимфоцитов.

б) по наличию иммуноглобулиновых рецепторов - реакция иммунофлюоресценции; позволяет обнаружить на поверхности В-лимфоцита иммуноглобулиновые рецепторы. Для этого используются антиглобулиновые сыворотки, меченые люминофорами.

в) по наличию рецепторов к эритроцитам мыши - реакция МЕ-розеткообразования. Реакция роэеткообразования с мышиными эритроцитами появляется в результате смешивания последних с лимфоцитами периферической крови.

Функциональная характеристика В-лимфоцитов и количества иммуноглобулинов различных классов. Чаще других используется метод радиальной иммунодиффузии в агаре: на стеклянную пластину наливают расплавленный агар, содержаций антитела к даннному классу иммуноглобулинов. В агаре выбивают лунки, в которые вносят образцы изучаемых сывороток. В результате иммунопреципитации, образуются радиальные полоски, диаметр которых зависит от концентрации соответствующего иммуноглобулина. - Определение антител к аутоантигенам или к микробам нормальной микрофлоры.

Определение титра специфических антител, вырабатывающихся в организме человека после иммунизации его вакцинами.

55. Гуморальный иммунный ответ: определение, этапы развития. Активация, пролиферация и дифференцировка клеток. Элиминация антигена. Т-зависимый и Т-независимый ответ. Проявления первичного и вторичного гуморального иммунного ответа.

Этапы ГИО :

Представление антигена (распознавание, переработка и презентация антигена).

Индуктивная стадия (передача информации на соответствующий клон В-лимфоцитов, их пролиферация и дифференцировка).

Эффекторная стадия (синтез антител и образование В-лимфоцитов памяти).

Т-независимая активация В-лимфоцитов - прямая стимуляция В-лимфоцитов без участия Т-лимфоцитов Т-независимыми антигенами.

Этими АГ являются ЛПС или полисахариды микробов, имеющих линейно повторяющиеся структуры.

Связываясь с ВКР, они или активируют соответствующий клон В-лимфоцитов (полисахариды пневмококков) или вызывают поликлональную активацию В-лимфоцитов (ЛПС грам- бактерий), которые пролиферируют, дифференцируются в плазматические клетки, синтезирующие IgM.

В-лимфоциты памяти не образуются.

Т-зависимая активация В-лимфоцитов - осуществляется Т-зависимыми антигенами (белки, бактерии) при обязательном участии Т-лимфоцитов.

АПК захватывают антиген, процессирует его до низкомолекулярных пептидов и в комплексе с молекулой ГКГС II презентирует наивным Т-лимфоцитам (Тх0), которые взаимодействуют с ним рецептором ТКР и корецептором СD4.

Тх0 активируются, пролиферируют и превращаются в эффекторные клетки – Тх2.

ВКР распознает антиген и клетка поглощает его. После процессинга также образуется комплекс пептид-молекула ГКГС II класса, который В-лимфоциты представляют Тх2-хелперам.

В-Т-клеточное взаимодействие: Тх2 воспринимают сигнал с помощью ТКР и корецептора СD4. Однако для полноценной активации Т-хелперов необходима дополнительная стимуляция (костимуляция), которая осуществляется молекулами межклеточного взаимодействия (CD40-CD40L, CD80/86-CD28 и др). Эти процессы важны и для активации В-лимфоцитов. В случае отсутствия костимуляции наступает апоптоз Т-лимфоцитов.

Активированный Тх2 продуцирует ИЛ-4, 5, 6, 10, под влиянием которых происходит пролиферация В-лимфоцитов, превращение их в бласты и затем в плазматические клетки, синтезирующие антитела. Именно при участии цитокинов Тх2 возможно переключение иммуноглобулиновых генов В-лимфоцитов, что обеспечивает синтез иммуноглобулинов различных классов.

Часть бластных клеток превращаются в В-лимфоциты памяти. Небольшая популяция клеток, образующаяся в процессе гуморального иммунного ответа из активированных В-лимфоцитов. Переживают в состоянии функционального покоя многие годы после элиминации антигена из организма. Несут «память» об антигене в виде антигенспецифических ВКР (преимущественно IgG).

Первичный иммунный ответ развивается на первое попадание антигена в организм после латентного периода (2-3 дня). Первыми синтезируются IgM (выявляются через 2-3 суток), а затем IgG (пик на 10-14 сутки, могут сохраняться в низком титре в течение всей жизни). Параллельно отмечается небольшое увеличение уровня IgA, IgE, IgD. Первичный иммунный ответ затихает через 2-3 недели после стимуляции антигеном. После него остаются клетки памяти и может долго поддерживаться следовой уровень IgG-антител.

Вторичный иммунный ответ за счет В-клеток памяти стимуляция синтеза антител наступает быстро (через 1-3 дня). Количество антител резко увеличивается, причем сразу синтезируются IgG, титры которых во много раз больше, чем при первичном иммунном ответе. Возрастает их аффинность (сродство) к антигену. На слизистых оболочках значительно увеличивается уровень секреторных IgA-антител. Уровень IgM-антител существенно не меняется из-за отсутствия В-клеток памяти с рецептором IgM. Время затухания вторичного значительно превосходит длительность сохранения антител при первичном иммунном ответе.