Возбудитель сифилиса – это грамотрицательная бактерия, имеющая вид спирохеты. Она называется бледная трепонема. Свое наименование патогенный микроорганизм получил за белую верхнюю оболочку, а также за невосприимчивость к большинству стандартных красителей, которые использует при микроскопии. Заразиться бактерией можно при непосредственном контакте с очагом заболевания на коже больного, а также при попадании инфицированных жидкостей (слюны, спермы) на слизистые оболочки или поврежденный кожный покров. На то, чтобы избавиться от сифилиса, может уйти более двух лет.

Возбудитель сифилиса, описание вида бактерий

Treponema pallidum (лат. название бактерии) – это одноклеточный микроорганизм, тело которого имеет форму спирали. Количество ее завитков колеблется в диапазоне от 8 до 14 штук, они расположены на равном расстоянии друг от друга. На каждом конце клетка имеет по несколько жгутиков, которые помогают ей передвигаться в зараженном организме.

Бледная спирохета относится к грамотрицательным бактериям, то есть при проведении исследования по Граму патогенные клетки не окрашиваются в голубой или фиолетовый цвет, а остаются розовыми. Тело микроорганизма покрыто защитной капсулой, которая состоит из слизистых структур. Внутри трепонемы присутствует много гидрофобных элементов, поэтому она не восприимчива к анилиновым красителям.

В природе известно четыре патогенных для человека подвида бледной спирохеты:

• T. pallidum pallidum – вызывает обычный сифилис;
• T. pallidum endemicum – провоцирует развитие эндемического (невенерического) сифилиса (беджель);
• T. pallidum pertenue – причина такого заболевания как фрамбезия (инфекционное поражение кожи, подкожных структур, суставов и костей);
• T. pallidum carateum – является возбудителем пинты (патологическим изменениям поддаются только слизистые оболочки и кожный покров).

Интересно, что размножаться грамотрицательные спирохеты могут только при определенной температуре – около 37° С. Кроме того, деление одной бактерии происходит приблизительно один раз в 30 часов. С этими факторами связан довольно длительный период инкубации в организме человека (3-4 недели).

В природных условиях заболеть сифилисом может только человек, поскольку животные практически невосприимчивы к трепонемам. Однако искусственно удалось заразить и вызвать появление клинической картины у кроликов, обезьян и хомячков.

Устойчивость во внешней среде

Бледная спирохета неустойчива во внешней среде, покинув организм хозяина, она погибает в течение максимум нескольких часов. Срок жизнедеятельности вне человеческого тела зависит от влияющих на нее факторов окружающего мира:

• температура более 40° С – 4-6 часов;
• повышение температуры до 55° С укорачивает срок жизни трепонемы до 15 минут;
• при высушивании микроорганизм погибает мгновенно;
• моментально умирает под воздействием кислот и щелочей;
• в 40% растворе этанола способна сохранять подвижность около получаса, но при 60% обездвиживается сразу.

Бактерия хорошо переносит низкие температуры, при -7° С ее жизнеспособность не снижается, а при заморозке (-18° С) она способна сохранять свою патогенность в течение года.

Заражение сифилисом обычно происходит только при близком контакте с больным человеком или жидкостями его организма (незащищенный половой акт, выполнение медицинских вмешательств). Бытовой путь передачи встречается редко, обычно про него говорят тогда, когда отсутствует возможность доказать заражение другим способом.

Размножение бледных трепонем

Размножаются патогенные трепонемы путем поперечного деления, которое происходит в несколько этапов:

• значительное увеличение клетки в размерах;
• сужение места, где произойдет деление;
• растягивание и разрывание клеточной оболочки;
• расхождение группы новых микроорганизмов.

У бледных спирохет относительно длительный цикл деления – 30-34 часа, в то время как у прочих микроорганизмов на это уходит 20-40 минут. Ученые предполагают, что, кроме поперечного деления, трепонемы способны размножаться половым путем. Однако это происходит редко и только при благоприятных условиях в организме-хозяине.

Бактерии под микроскопом

Поскольку трепонема поддается окрашиванию только с использованием дорогих и сложных методик, для ее изучения используют темнопольную микроскопию. Это позволяет значительно удешевить и ускорить процесс исследования биологического материала.

При увеличении в 1000 раз микроорганизм напоминает тонкую спираль, как штопор, имеет правильные, равномерные завитки. Движение бактерии происходят плавно, без рывков, она вращается вокруг своей оси и совершает маятникообразные покачивания. Тело спирохеты обладает хорошей упругостью, что позволяет ей, сжимаясь и разжимаясь, раздвигать небольшие препятствия на своем пути, например, элементы крови.

Однако увеличив силу микроскопа до 4500 раз, можно увидеть, что завитки микроорганизма утратили свою правильность. А также становится заметна неравномерность толщины тельца и его окраса: кончики выглядят более светлыми.

Так как деление трепонемы занимает много времени, инкубационный период сифилиса в среднем длится 3-4 недели. При ослаблении иммунитета или из-за повторного заражения скрытый этап может пройти быстрее, за 7-14 дней. И наоборот, при хорошем здоровье или приеме антибиотиков, он может удлиниться до 190 дней.

Для инкубации характерно отсутствие каких-либо клинических проявлений. Больной чувствует себя хорошо, не предъявляет никаких жалоб. В жидкостях организма невозможно определить бледных трепонем, поскольку их количество слишком мало, реакция Вассермана показывает отрицательный результат. В этот период человек еще не заразный, распространять бактерии он начинает за несколько дней до появления твердого шанкра.

В организме вырабатываются антитела к возбудителю сифилиса, однако, они исчезают практически сразу после выздоровления. Заразиться трепонемой повторно можно уже через 1-2 дня после успешной терапии, поэтому важно проводить лечение сразу обоих половых партнеров одновременно.

Первичная форма – первая стадия болезни, начинается сразу же после инкубационного периода, через 3-4 недели от заражения. Для нее характерно:

• появление твердого шанкра (круглой язвы с четкими границами) на месте проникновения трепонемы в организм. Чаще всего локализуется на половом члене, половых губах, на слизистой оболочке у входа во влагалище;
• безболезненное увеличение лимфоузлов, расположенных недалеко от ворот инфекции.

Вторичная форма возникает через 2-3 месяца после незалеченного первичного сифилиса. Признаки:

• большое количество разнообразных высыпаний на кожном покрове и слизистых оболочках (розоватые пятна, папулы и гнойничковые поражения);
• распространение бледных спирохет по кровяному руслу, проникновение их в органы.

Третичная форма – развивается очень медленно, клиническая картина начинает проявляться спустя 6-8 лет от момента заражения. Тяжело поддается лечению, вызывает необратимые изменения во внутренних органах больного. На коже появляются твердые бугорки (по 3-4 см), наполненные вязкой жидкостью, в которой плавают трепонемы. Со временем они распадаются, оставляя на коже и слизистых значительные дефекты.

Третья стадия болезни встречается крайне редко, поскольку методы диагностики позволяют определить заболевание в ранних формах. Лечение сифилиса трудное и длительное, оно требует регулярного приема препаратов по специальной схеме, которую подобрать и разработать может только специалист.

Содержание статьи

Бледная трепонема

Морфология и физиология

T.pallidum имеет форму спирали, протоплшматический цилиндр, который скручен в 8-12 завитков. От концов клетки отходят 3 периплазматических жгутика. Бледная трепонема плохо воспринимает анилиновые красители, поэтому ее окрашивают краской Романовского-Гимза. Однако наиболее эффективным методом является ее изучение в темнопольном или фазовоконтрастном микроскопе. Микроаэрофил. На искусственных питательных средах не растет. Т. pallidum культивируют в ткани яичка кролика, где она хорошо размножается и полностью сохраняет свои свойства, вызывая у животного орхит. Антигены. Антигенная структура Т. pallidum сложная. Она связана с белками наружной мембраны, липопротеидами. Последние являются перекрестно реагирующими антигенами, общими для человека и крупного рогатого скота. Они используются в качестве антигена в реакции Вассермана для серодиагностики сифилиса.

Патогенность и патогенез

К факторам вирулентности бледной трепонемы относят белки наружной мембраны и ЛПС, проявляющие свои токсические свойства после освобождения из клетки. Вместе с тем, по-видимому, способность трепонемы при делении образовывать отдельные фрагменты, проникающие вглубь тканей, также можно отнести к факторам вирулентности. В патогенезе сифилиса различают три стадии. При первичном сифилисе наблюдается образование первичного очага - твердого шанкра в месте входных ворот инфекции, с последующим проникновением в регионарные лимфоузлы, где возбудитель размножается и накапливается. Первичный сифилис продолжается около 6 недель. Вторая стадия характеризуется генерализацией инфекции, сопровождающейся проникновением и циркуляцией возбудителя в крови, что сопровождается кожными высыпаниями. Продолжительность вторичного сифилиса у нелеченых больных колеблется в пределах 1-2 лет. В третьей стадии обнаруживаются инфекционные гранулемы (гуммы, склонные к распаду), локализующихся во внутренних органах и тканях. Данный период у нелеченых больных продолжается несколько лет и заканчивается поражением ЦНС (прогрессивный паралич) либо спинного мозга (спинная сухотка).

Иммунитет

При сифилисе имеет место гуморальный и клеточный иммунный ответ. Образующиеся антитела не обладают протективными свойствами. Клеточный иммунный ответ связан с фиксацией возбудителя и образованием гранулем. Однако элиминации трепонем из организма при этом не происходит. Вместе с тем неблагоприятные условия среды индуцируют образование трепонемами цист, которые локализуются в стенке кровеносных сосудов. Полагают, что это свидетельствует о переходе заболевания в стадию ремиссии. Наряду с цистами трепонемы образуют L-формы. При сифилисе формируется ГЗТ, которая может быть выявлена кожно-аллергической пробой с убитой взвесью трепонем. Полагают, что проявление третичного периода сифилиса связано с ГЗТ.

Экология и эпидемиология

Сифилис - типично антропонозная инфекция. Болеют только люди, которые являются резервуаром инфекции в природе. Передача инфекции происходит половым путем и значительно реже - через белье и другие предметы. Во внешней среде (воздух) трепонемы быстро погибают.

Сифилис и другие трепонематозы

Сифилис - хроническая инфекционная венерическая болезнь человека, имеет циклический прогрессирующее течение, поражает кожу, слизистые оболочки, внутренние органы и нервную систему. Возбудителем заболевания является Treponema pallidum.Различают три основные периоды развития сифилиса, методы лабораторной диагностики которых имеют свои особенности. В ранний период болезни материалом для лабораторной диагностики служит выделение из твердого шанкра, пунктат с лимфатических узлов, соскобы с розеол, сифилид подобное. При вторичном и третичном периодах исследуют сыворотку крови и ликвор.В связи с тем, что выделение чистых культур трепонем в обычных бактериологических лабораториях невозможно, во время первичного периода болезни (редко позже) проводят бактериоскопический метод диагностики. Начиная с вторичного периода, используют, в основном, серологические методы.

Бактериоскопическое исследования

Перед взятием патологического материала сначала сифилитическую язву протирают ватным тампоном, для удаления сального налета и контаминуючои микрофлоры. Затем дно твердого шанкра раздражают скальпелем или металлической лопаточкой или энергично сжимают язву с боков пальцами в резиновой перчатке к выделению раневого экссудата. При небольшомколичества прозрачной жидкости ее можно внести в каплю 0,85% раствора хлорида натрия. При невозможности взять материал со дна шанкра (фимоз, рубцевание язвы и др.) проводят пункцию регионарных лимфатических узлов.Каплю жидкости из язвы или пунктата наносят на тонкое предметное стекло (1,1-1,2 мм), накрывают покровным стеклом и исследуют в темном поле зрения (краще!), или с помощью фазово-контрастного или аноптрального микроскопа.Бледная трепонема в темном поле зрения имеет вид слегка блестящей тонкой нежной спирали с крутыми равномерными округлыми первичными завитками. Движения плавные, тем она изгибается под углом. Но особенно характерные для нее Маятникообразные колебания. Возбудитель сифилиса необходимо отличать от Treponema refringens (что колонизирует наружные половые органы), которая толще, грубее, с неравномерными крупными завитками и имеет активные беспорядочные движения, но не сгибается. Трепонемы фузосп-ирохетозного симбиоза отличаются тонким рисунком, пологими завитками и беспорядочным движением.При диагностике ротового сифилиса бледную трепонему следует дифференцировать и от зубных трепонем, особенно Т. dentium, а также от Т. buccalis. Первую из них вообще трудно отличить от сифилитического. Она, правда, короче, имеет 4-8 острых завитков, маятникообразное движение отсутствует. Т. buccalis толще, имеет грубые первоначальные завитки и беспорядочное движение.При любых сомнениях нужно учитывать, что все сапрофитные трепонемы, в отличие от бледной, хорошо окрашиваются анилиновыми красителями. Они не проникают в лимфатические узлы, поэтому исследования пунктатов имеет большую диагностическую ценность. Выявление в пунктате лимфатических узлов типовых трепонем беспрекословно подтверждает диагноз сифилиса.Итак, темнопольная исследования надавленные капли является наилучшим методом выявления возбудителя сифилиса. Его преимущества заключаются в том, что материал исследуют быстро, а морфология трепонем в живом состоянии наиболее характерна. Тушови мазки по методу Бурри теперь не используют.В случае невозможности провести исследование в темном поле зрения можно использовать различные методы окрашивания. Бледная трепонема плохо воспринимает анилиновые красители. Из многих предложенных способов окраски лучшие результаты получают при использовании окраски по Романовеьким-Гимзе. Изготовленные мазки фиксируют метиловым спиртом или в смеси Никифорова. Четкость результаты получают, когда краску Романовского-Гимзы наливают в препарат. Для этого в чашку Петри помещают обломки спичек, на них помещают предметное стекло мазком вниз и наливают краситель до тех пор, пока он смочите мазок. Время окраски при этом удваивают. При микроскопии бледные трепонемы имеют нежно-розовый цвет, а другие виды трепонем окрашиваются в синий или сине-фиолетовый цвет.Можно использовать и метод серебрения Морозовым. Трепонемы полностью сохраняют свои морфологические особенности и выглядят под микроскопом коричневыми или почти черными. Но посеребренные препараты долго не хранятся. В последнее время методы окрашивания трепонем применяют редко.Если начато лечение сифилиса химиопрепаратами, выявить возбудитель в патологических материалах даже с помощью темного поля зрения практически не удается. При получении отрицательного анализа его необходимо повторить.

Серологическая диагностика сифилиса

При проведении серологических реакций теперь используют следующие унифицированные в Украине методы исследований: реакции связывания комплемента (РСК), иммунофлуоресценции (РИФ), иммобилизации трепонем (PIT), микрореакцию преципитации (МПР) и иммуноферментный анализ (ИФА).На протяжении многих лет основной и наиболее распространенной реакцией считалась реакция связывания комплемента или реакция Вассермана (РВ, RW). Для ее постановки используют сыворотку крови больного сифилисом и спинномозговую жидкость при поражении нервной системы.Методика постановки реакции Вассермана не отличается от техники проведения РСК. Разница лишь в том, что для РО используют не только специфический трепонемный, а неспецифический кардиолипиновый антиген.l Взятие 5-10 мл крови из локтевой вены проводят натощак или не ранее 6 часов после приема пищи. Нельзя брать кровь у больных с повышенной температурой, после употребления алкоголя и жирной пищи, у беременных женщин за 10 дней до родов и рожениц. Добытую из крови сыворотку прогревают при температуре 56 ° С в течение 30 мин для инактивации собственного комплемента. РО обязательно ставят с двумя антигенами: специфическим и неспецифическим.Специфический ультраозвучений трепонемный антиген готовят из культур бледных трепонем (штамм Рейтера), выращенных в пробирках и подверженных действию ультразвука. Его выпускают в виде лиофильно высушенного порошка. Неспецифический кардиолипиновый антиген готовят путем спиртового экстрагирования липидов с бычьего сердца и очистки от балластных смесей, расфасовывают в ампулы по 2 мл. Для введения антигена в РО его титруют согласно данной инструкции. Непосредственно перед постановкой РВ проводят титрование комплемента и гемолитической сыворотки по такой же схеме, как и в РСК. Реакцию Вассермана ставят как качественным, так и количественным методом. Качественную реакцию проводят в трех пробирках с двумя антигенами по обычной схеме.Результаты реакции оценивают по 4 плюсовой системе: положительная реакция - когда есть полная или значительная задержка гемолиза (4 +, 3 +); слабоположительная реакция - частичная задержка гемолиза (2 +); сомнительная реакция - незначительная задержка гемолиза (1 +). В случае возникновения полного гемолиза РО считают отрицательной.Каждую сыворотку, которая дала положительную качественную реакцию, необходимо исследовать и количественным методом с последовательным ее разведением от 1:10 до 1:640.Титром исследуемой сыворотки (титр реагинов) считают то максимальное ее разведение, при котором наступает полная (4 +) или значка (3 +) задержка гемолиза. Количественный метод постановки РО имеет важное значение для оценки эффективности лечения сифилиса. Быстрое снижение титра реагинов указывает на успешную терапию. Если титр сыворотки долго не снижается, это свидетельствует об отсутствии эффективности применяемых препаратов и необходимость изменить тактику лечения.При пилозри на серонегативный первичный сифилис или скрытый, третичный или врожденный, рекомендуют ставить реакцию Вассермана на холоде по той же схеме. В случае подозрения на нейросифилис РО проводят со спинномозговой жидкостью, которую инактивируют, поскольку она не содержит собственного комплемента. В реакцию вводят неразведенный ликвор и в разведениях 1:2 и 1:5.Реакция Вассермана становится положительной через 2-3 недели после появления твердого шанкра. При вторичном сифилисе она выпадает положительной в 100% случаев, в третичном - в 75%.Кроме того, в комплексе серологических реакций (КСР) как скрининг-тест используют микрореакцию преципитации с плазмой крови или инактивированной сывороткой.

Микрореакция преципитации

Микрореакцию преципитации ставят с кардиолипиновым антигеном. Принцип реакции заключается в том, что при добавлении к плазме или сыворотке крови больного сифилисом эмульсии кардиолипинового антигена образуется преципитат (комплекс антиген-антитело), который осаждается в виде хлопьев белого цвета. Пользуются такой методике: в лунку пластины вносят пипеткой три капли плазмы (или инактивированной сыворотки), затем добавляют одну каплю эмульсии стандартного кардиолипинового антигена. Компоненты реакции смешивают встряхиванием пластины в течение 5 мин, после чего добавляют три капли 0,9% раствора хлорида натрия и оставляют при комнатной температуре еще на 5 мин. Обязательном контроле со слабоположительный сывороткой крови. Результаты оценивают невооруженным глазом над искусственным источником освещения. При появлении в лунке крупных хлопьев реакцию считают положительной (4 +, 3 +), средних и мелких - как слабоположительные (2 +, 1 +). При отрицательном результате преципитат не образуется.Микрореакцию преципитации можно проводить и количественным методом для установления титра преципитирующих антител и оценки на этой основе эффективности лечения. Более высокие титры МРП получают с плазмой, чем с сывороткой. За рубежом аналогом МРП с сывороткой больного является VDRL (Veneral disease research laboratoiy), а с плазмой - RPR (Rapid plasma reagin).

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ)

К группе специфических реакций, которые широко употребляются для серологической диагностики сифилиса, относится непрямая реакция иммунофлюоресценции. Как антиген, в ней используют взвесь патогенных бледных трепонем штамма Никольса из паренхимы яичек кролика на 7-й день после заражения. Реакцию ставят в двух модификациях: РИФ-АБС и РИФ-200. В первом варианте используют сорбент антител (соникат) - ультраозвучений трепонемный антиген для РСК. Его выпускает Каунасское предприятие по производству бактерийных препаратов (Литва). При варианте РИФ-200 сыворотку больного разводят в 200 раз с целью снять влияние групповых протитрепонемних антител.Постановку РИФ-АБС проводят на тонких, хорошо обезжиренных предметных стеклах. На обратной стороне стекол стеклорезом обозначены 10 кружочков диаметром 0,7 см. В рамках кружка на стекло наносят антиген - взвесь бледных трепонем - в таком количестве, чтобы в поле зрения их было 50-60. Мазки высушивают на воздухе, фиксируют над пламенем и 10 мин в ацетоне. В отдельную пробирку вносят 0,2 мл сорбента (соникату) и 0,5 мл сыворотки крови больного, хорошо перемешивают. Смесь наносят на мазок (антиген) так, чтобы равномерно его покрыть, выдерживают 30 мин во влажной камере при 3 7 ° С (II фаза реакции). После этого мазок промывают фосфатным буфером, высушивают и наносят на него антишобулинову флуоресцентных сыворотку на 30 мин, ставят во влажную камеру при 37 ° С (II фаза). Препарат вновь промывают фосфатным буфером, высушивают и исследуют под люминесцентным микроскопом.При положительной реакции бледные трепонемы излучают золотисто-зеленый свет, при отрицательной - не светятся.Техника постановки РИФ-200 такое же, как и РИФ-АБС, только сыворотку крови больного предварительно разводят в 200 раз фосфатным буфером. При проведенииреакции иммунофлюоресценции со спинномозговой жидкостью больного сифилисом нервной системы используют РИФ-ц и РИФ-10, т.е. ликвор вводят в реакцию неинактивованим и разведенным, или разведенным 1:10.

Реакция имобилизации бледных трепонем (PИT)

Реакция имобилизации бледных трепонем (PИT) основан на феномене потери их подвижности в присутствии иммобилизирующие протитрепонемних антител сыворотки больного и комплемента в условиях анаэробиоза. Как антиген в реакции используют взвесь бледных трепонем из тестикулярной ткани кролика, зараженного лабораторным штаммом Никольса. Взвесь разводят стерильным 0,85% раствором хлорида натрия так, чтобы в поле зрения было 10-15 спирохет.Для проведения реакции в стерильной пробирке смешивают 0,05 мл сыворотки крови больного, 0,35 мл антигена и 0,15 мл комплемента. Опыт сопровождают контролями сыворотки, антигена и комплемента. Пробирки помещают в анаеростат, создают анаробни условия и выдерживают в термостате 18-20 ч при температуре 35 ° С. Затем из каждой пробирки готовят препарат надавленные капли, подсчитывают не менее 25 трепонем и отмечают, сколько из них подвижных и сколько неподвижных. Процент специфической иммобилизации бледных трепонем подсчитывают по формуле: х = (А-В) / В * 100, где X - процент иммобилизации, А - число подвижных трепонем в контрольной пробирке, В - число подвижных трепонем в опытной пробирке. Реакция считается положительной, когда процент иммобилизации составляет 50 и более, слабоположительный - от 30 до 50, сомнительной - от 20 до 30 и отрицательной - от 0 до 20.В практических лабораториях используют более простой меланжерний метод PIT за М.М. Овчинниковым. Анаэробные условия опыта создаются помещением реагирующей смеси (сыворотки, антиген, комплемент) в меланжеры, оба конца которого закрывают резиновым кольцом. Меланжерна методика позволяет обойтись без сложного оборудования и аппаратуры для создания анаэробиоза, но дает такие результаты, которые не посту паються классической микроанаеростатний методике.Реакции иммобилизации трепонем и иммунофлуоресценции считают наиболее специфичными в серологической диагностике сифилиса. И все же, PIT, несмотря на ее специфичность, не рекомендуют для использования в широкой практике из-за трудоемкости постановки.

Иммуноферментный анализ (ИФА)

Иммуноферментный анализ (ИФА) проводят как с кадриолипиновим антигеном (неспецифическая, отборочная реакция), так и трепонемным (специфическая реакция), которая подтверждает диагноз сифилиса.Принцип непрямого метода ИФА заключается в том, что в антигена, адсорбированного на твердой фазе в лунках планшета вносят исследуемую сыворотку. Если она содержит антитела против трепонем, образуется комплекс антиген-антитело (II фаза). После отмывания несвязанных неспецифических антител в лунки вносят антиглобулинову сыворотку, конъюгированные с ферментом (чаще всего с пероксидазой хрена). Конъюгат прочно присоединяется к комплексу антиген-антитело (II фаза).После отмывания несвязанного конъюгата в лунки добавляют окрашивающий субстрат ОФД - ортофенилендиамин (III фаза). Пероксидазную реакцию останавливают, добавляя серную кислоту. Для контроля ставят такие же пробы с положительным и заведомо отрицательной сыворотками.Учет результатов анализа проводят с помощью фотометра, который определяет оптическую плотность в двухволновом режиме (492 нм и 620 нм). Для постановки реакции ензиммичених антител, кроме фотометра, нужны одно-и восьмиканальные автоматические пипетки с полипропиленовым наконечником и соответствующие наборы диагностических тест-систем.Метод ИФА находит широкое применение в серологической диагностике сифилиса. Он одинаково эффективен для выявления болезни в инкубационном периоде (через 1-2 недели после инфицирования), при клинических проявлениях болезни и скрытых его формах. Очень часто ИФА используют при скрининговых обследованиях населения, особенно на станциях переливания крови.В лабораторной практике иногда применяют также реакцию иммунной прилипания (РИП) и реакцию непрямой гемагглютинации (РНГА). Первая из них основывается на том, что патогенные тестикулярные трепонемы штамма Никольса при смешивании с сывороткой больного в присутствии комплемента и эритроцитов человека прилипают к поверхности красных кровяных телец. РНГА достаточно широко используется для диагностики сифилиса благодаря своей методической простоте. Она становится положительной уже через три недели после заражения. Положительный результат реакции остается годами после выздоровления. Аналогом этой реакции за рубежом является ТРНА (Treponema pallidum haemoagglutination).

Есть множество самых разных бактерий и вирусов, которые могут угрожать здоровью человека. Со многими из них мы легко можем столкнуться в повседневной жизни, другие же способны проникнуть в организм лишь в определенных предрасполагающих ситуациях. Как раз к последним относят те организмы, которые провоцируют развитие венерологических заболеваний. Они передаются большей частью лишь во время полового акта. Одним из таких организмов является бледная спирохета - возбудитель сифилиса. Поговорим о ее особенностях чуть более подробно.

Бледная спирохета – особенности и характеристики

Бледная спирохета также известна под наименованием бледная трепонема, по своей сути она является представителем порядка спирохеталий, семейства спирохет, рода трепонем и вида тепонема паллидум. Свое наименование такой возбудитель получил за способность воспринимать окраску. Еще в 1905 году двое ученых Шаулнн и Гоффман провели исследование отделяемого из папулы, расположенной на половых органах, где и обнаружили спирохету, которая слабо преломляла свет. Ее признали возбудителем сифилиса и дали название бледной спирохеты.

Бледная трепонема характеризуется спиралевидной формой, она может состоять из восьми-двенадцати закругленных завитков, которые располагаются с одинаковым интервалом друг от друга. Высота таких завитков несколько снижается к окончанию спирохеты. Такой микроорганизм способен совершать характерные движения – он вращается вокруг свой оси, как бы ввинчиваясь внутрь трещинки кожи либо слизистой.

Такой возбудитель может иметь разную длину, и чаще всего достигает шести-десяти мкм. Толщина данной трепонемы может доходить до 0,25 микрон.

Бледная спирохета относится к анаэробам, она способна проживать в среде без кислорода. Такой возбудитель находится в очагах поражения большей частью в межтканевых щелях, а также в различных клеточках. Кроме того его обнаруживали в околососудистом пространстве, внутри кровеносных и лимфатических сосудов, а также в нервных волокнах.

Такая трепонема достаточно неустойчива за пределами организма, она отличается особенной чувствительностью к внешнему воздействию и весьма быстро погибает при высыхании. Оптимальной температурой для бледной спирохеты принято считать 37С, если на нее действует температура в 60С, то она погибает спустя четверть часа, а при воздействии температурой в 100С – моментально.

Если трепонема находится при комнатной температуре и в достаточно влажной среде, она может сохранять свою подвижность до двенадцати часов. Нахождение в более низкой температуре способствует лучшей сохранности. Так ученые доказали, что бледная спирохета может оставаться заразной в течение девяти лет, если находится в температурных условиях около -70С.

Специалисты утверждают, что такая трепонема отличается особенной подвижностью. При малейшей возможности она старается проникнуть внутрь организма и начать размножение.

Благодаря высокой устойчивости к внешним воздействиям бледная спирохета способна с легкостью передаваться от человека к человеку не только при половом акте, но и в быту, к примеру, через общее полотенце либо посуду. Именно из-за такой особенности сифилис считают крайне заразным заболеванием.

О сифилисе

Сифилис появился в Европе, примерно в 15 веке. С того времени данный недуг уверенно шествует по всему миру, и избавиться от него полностью никак не удается. Считается, что сифилис находится на третьем месте по распространенности среди всех болезней, передающихся половым путем. Каждый год примерно двенадцать миллионов новых больных приходят на прием с таким диагнозом. Кроме того есть огромное количество пациентов, чьи истории болезни не попадают в статистические таблицы.

Ученые утверждают, что чаще всего сифилис диагностируется у людей, возрастом от пятнадцати и до сорока лет, а максимальный пик заболеваемости приходится на мужчин от двадцати и до двадцати девяти лет. У женщин данный недуг встречается гораздо реже.

Сейчас известно несколько стран, где такая болезнь практически изжила себя. Они представлены Великобританией и странами Скандинавии.

В нашей стране не существует единого учета всех пациентов с диагнозом «сифилис». Однако есть данные, что самый большой уровень заболеваемости характерен для Дальневосточного, Сибирского и Приволжского округа.

Современные методы терапии

Наши давние предки лечили сифилис ртутью и ртутными мазями, сейчас же такой достаточно опасный, но в то же время распространенный недуг лечат давно известным пенициллином и его производными. Удивительно, но бледная трепонема является чуть ли не единственным микроорганизмом, который смог до сегодняшнего времени сохранить уникальную и достаточно высокую чувствительность к данном антибиотику. Лишь при наличии у пациента аллергии на пенициллин либо при неожиданной устойчивости возбудителя терапия может осуществляться с использованием эритромицина, производных тетрациклина или цефалоспоринами.

Также современная терапия сифилиса частенько подразумевает применение иммуномодуляторов, представленных метилурацилом либо циклофероном. Высокой популярностью пользуются биостимуляторы, к примеру, алоэ и пр.

Итак, бледная спирохета известна человечеству уже много веков, и сегодня, к счастью, сифилис, который она вызывает, вполне поддается лекарственному лечению.

Екатерина, www.сайт

P.S. В тексте употреблены некоторые формы свойственные устной речи.

Бледная трепонема (Treponema pallidum) – вид грамотрицательных болезнетворных бактерий, являющихся возбудителями широко распространенного венерического заболевания – . Их открытие состоялось в 1905 году и принадлежит двум немецким ученым – Фрицу Шаудину и Эриху Гофману. Бактерии имеют спиралевидную форму и относятся к спирохетам. Количество завитков, как правило, варьирует в пределах от 8 до 14. Спираль сужается на концах, ее длина составляет от 4 до 20 мкм, ширина – 0,2 – 0,5 мкм, а глубина обычно не превышает 1 мкм. Ядро отсутствует, генетический материал представлен в виде молекул ДНК, организованных в хромосомы. Клеточная стенка образована полисахаридами, что придает ей прочность и защищает ее содержимое от неблагоприятного воздействия внешних факторов, в том числе и от атак клеток иммунной системы человека.

Характер движения микробов напоминает таковой у штопора – они вращаются вокруг своей оси и таким образом внедряются в окружающее пространство. Проникновению их в ткань способствует наличие микротравм – трещин, порезов, язвочек. Бледная спирохета отличается высокой подвижностью, своим названием она обязана тому, что достаточно плохо окрашивается специальными красителями, используемыми в лабораторной диагностике заболеваний, передающихся половым путем. Это объясняется наличием в ее цитоплазме большого количества гидрофобных элементов. Для обнаружения ее неокрашенных клеток, которые невозможно увидеть в обычный микроскоп, используют метод темнопольной микроскопии или флюоресценции.

Для первичного выявления возбудителя сифилиса исследуют материал, собранный из язв и папул, образующихся на слизистых оболочках половых органов, ротовой полости, прямого кишечника. Иногда производят пункцию лимфатических узлов. В дальнейшем анализу подвергается сыворотка крови и спинномозговая жидкость, в которых посредством серологических методов можно обнаружить специфические антитела. Заражение в большинстве случаев происходит половым путем. Кроме того, оно возможно в бытовых условиях (общее полотенце, посуда), при переливании крови, во время внутриутробного развития плода или прохождения ребенка по родовым путям больной женщины.

Во внешней среде возбудитель сифилиса быстро погибает, особенно при воздействии дезинфицирующих и антисептических средств. Несколько дольше он сохраняется при высокой влажности и пониженной температуре. После проникновения в организм человека бледная трепонема начинает усиленно размножаться и распространяться по всему телу. Она вызывает тяжелое поражение кожных покровов и внутренних органов. Весьма неприятной особенностью Treponema pallidum является то, что организм человека не способен выработать иммунитет к этой инфекции, поэтому даже после успешного лечения сифилиса существует вероятность повторного заражения.

Возбудитель сифилиса - бледная трепонема (Trepo nema pallidum) - была открыта Schaudinn и Hoffman в 1905 г. Они обнаружили ее у больных сифилисом в мор фологических элементах кожной сыпи и лимфатических узлах. В 1912 г. Noguchi и Moore выявили ее в коре головного мозга у больных с прогрессивным параличом.

T. pallidum представляет собой прокариотный микро

Организм: у нее отсутствует ядерная мембрана, ДНК не разделена на хромосомы, она размножается поперечным делением, ее клеточная стенка содержит муреиновые макромолекулы.

T. pallidum относится к порядку Spirochaetalis, семей

Ству Spirochaetaecae, так же как Borrelia и Leptospira, роду Treponema, виду Treponema pallidum. Название «бледная» трепонема получила из за слабой способности вос принимать окраску. Микроорганизмы рода Treponema встречаются у человека и животных, бывают патогенными или сапрофитными. К патогенным для человека относятся T. pallidum (возбудитель венерического и невенерического сифилиса); T. carateum, T. bojel, T. pertenue (возбуди тель пинты, фрамбезии и беджеля); патогенными для жи вотных являются T. cuniculi, вызывающая в естественных условиях сифилис у кроликов, и T. Fribourg Blanc - воз будитель сифилиса у обезьян.

К сапрофитным для человека или животных относятся T. microdentium и T. macrodentium (в полости рта около краев десен и в фекалиях в области заднего прохода человека); T. denticola (в полости рта у человека и шимпанзе); T. refringens (нормальная микрофлора женских и мужских половых органов); T. orale (в складках десен у чело века); T. Scoliodentium и T. Vincentii (в полости рта у человека). Сапрофитные штаммы трепонем растут на искусственных питательных средах и имеют антигенные отличия от патогенных микроорганизмов.

В организме человека бледная трепонема существует в различных формах. Для заразных стадий заболевания характерна спиралевидная форма, при поздних и латентных стадиях сифилиса появляются инцистированные и L формы бледной трепонемы, устойчивые к воздействию неблагоприятных факторов внешней среды (антител, ле карственных препаратов, температурных воздействий, облучения и т. п.).

Эти формы бледной трепонемы являются основным способом сохранения и размножения инфекции при не благоприятных условиях и имеют важное значение для понимания патогенеза латентных форм сифилиса, возникновения рецидивов и неудач при лечении.

Hoffman в своей монографии «Die Aetiologieder Syphilis» (1906) дает следующее классическое описание бледной трепонемы: «В живом состоянии она представляется нежным, слабо преломляющим свет спиралевид ным образованием. Толщина ее едва достигает 1 мкм, дли на же колеблется в довольно широких пределах - от 6 до

20 и более микронов. Она состоит из многочисленных в среднем 8–12 завитков, отличающихся равномерностью, узостью и крутизной. Высота завитков по направлению к концам трепонемы несколько уменьшается, а расстояние между ними увеличивается». Встречаются очень корот кие экземпляры микроорганизма (в один виток) и очень длинные (особенно в культурах), имеющие до 20 завит ков и более.

Hoffman отмечает еще одну важную особенность бледной трепонемы - ее упругость, способность упорно сохранять свою форму правильной спирали. Даже попавшая между эритроцитами и покровным стеклом бледная трепонема, несмотря на испытываемое при этом давление, не выпрямляется.

Указанные выше морфологические особенности бледной трепонемы и ее весьма характерные движения имеют важное дифференциально диагностическое значение. В живом виде при микроскопии в темном поле движения бледной трепонемы характеризуются плавностью, изящностью и элегантностью, что значительно отличает ее от других трепонем (бледная трепонема движется с «чувст вом собственного достоинства»).

Различают четыре основных вида движения бледной трепонемы: сгибательное, ротаторное (ввинчивающееся, вращательное вокруг продольной оси), поступательное и контрактильное (волнообразное). Сгибательное (кача тельное, маятникообразное) движение заключается в способности бледной трепонемы сгибать свое тело в стороны наподобие маятника. Разновидностью сгибательно го движения является хлыстообразное (бичеобразное) движение, которое наблюдается при прикреплении трепо немы к какой либо клетке (лимфоциту, эритроциту и т. п.). В этих случаях трепонема производит энергичные движе ния, напоминающие удар бича или хлыста, как бы пытаясь освободиться от прикрепившейся к ней клетки. Поступа тельное движение характеризуется то более медленным, то более быстрым продвижением трепонемы в одном направ лении с периодами некоторого отступления назад. Рота торное движение обусловлено вращением трепонемы во круг своей оси. Контрактильное движение проявляется в виде волнообразных судорожных сокращений, пробегаю щих по всему телу трепонемы. Принято считать, что в ос нове структуры бледной трепонемы лежит осевая нить и слой протоплазмы, заключенной в оболочку - перипласт, устойчивый к трипсину.

Электронно микроскопическое строение бледной трепонемы сложное. Спиралевидная бледная трепонема имеет следующие морфологические компоненты: протоплазматический цилиндр, включающий нуклеотид, цито плазму и рибосомы, цитоплазматическую мембрану; мезо сомы. По длиннику протоплазматического цилиндра проходят фибриллы, прикрепляющиеся на концевых витках при помощи блефаропластов; снаружи от фибриллярных пучков расположена клеточная стенка, включающая трехслойную мембрану и периферически расположенную капсулоподобную субстанцию [Делекторский В. В., 1996]. Каждый последующий виток бледной трепонемы повто ряет строение основных морфологических структур (фибриллы, мембраны, сегменты протоплазматического цилиндра) предыдущего витка. Именно этот признак обеспечивает при поперечном делении воспроизводство однотипных спиралевидных экземпляров.

При заразных формах сифилиса, характеризующегося интенсивным размножением трепонем, выделяют особый морфологический тип возбудителя, который рассматри вается как форма «агрессии» [Делекторский В. В., 1996].

Бледные трепонемы имеют сложный антигенный со став (белковый, полисахаридный и липидные компонен ты), причем основная часть антигенов локализуется в клеточной стенке.

Трепонемы обычно размножаются поперечным делением. В этих случаях они увеличиваются, в месте будуще го деления суживаются, их оболочка растягивается и раз рывается на несколько частей с различным количеством завитков, на местах деления видны перемычки, блефаро пласты с той и другой стороны; вновь образующиеся фиб риллы и старые фибриллы; по краям места деления расположены мезосомы. Бледные трепонемы могут делиться не только пополам, но и на множество частей. Разделив шиеся клетки могут в течение некоторого времени тесно прилежать друг к другу. Полагают также, что помимо по перечного деления, у трепонемы возможны более слож ные циклы развития, в частности, половой путь размно жения.

Бледная трепонема размножается сравнительно медленно: сроки ее деления составляют 30–33 ч (большинство других микроорганизмов размножаются каждые 20–40 мин). Очень короткие (в один завиток) экземпля ры способны проходить через бактериальные фильтры с величиной пор 0,22 мкм (размер пор фильтров, приме няемых для стерилизующей фильтрации жидкостей).

При неблагоприятных условиях существования трепонемы могут образовывать «формы выживания» - цисты и L формы.

Инцистированные бледные трепонемы (цисты) имеют защитную оболочку (несколько слоев внешнего мембранного покрытия и капсулоподобную мукополисахаридную субстанцию), обеспечивающую устойчивость возбудите ля к неблагоприятным воздействиям внешней среды. Особенностью цист является их способность сохранять антигенные свойства, что выявляется положительными серологическими реакциями. Количество инцистированных форм бледных трепонем резко увеличивается по мере давности заболевания, достигая максимума при вто ричном рецидивном сифилисе. Наличием в организме больных этих цист, по видимому, объясняется длитель ное сохранение положительных серологических реакций крови через много лет после перенесенных ранних форм сифилиса, а также длительное бессимптомное течение си филиса, когда отсутствуют ранние активные формы забо левания, которые диагностируются случайно на основа нии положительных серологических реакций в крови или в стадии поражения нервной системы и внутренних орга нов.

Второй формой сохранения бледной трепонемы в ор

Ганизме больного является L трансформация микробной клетки (L формы). Эта трансформация является обще биологической закономерностью, присущей всем инфек ционным заболеваниям, особенно хроническим. L форма бледной трепонемы характеризуются частичной или пол ной утратой клеточной стенки, снижением метаболизма, нарушением процессов клеточного деления при интенсивном синтезе ДНК. Наиболее типичный морфологический вариант L форм бледных трепонем - большая спиралевидная форма, диаметром от 0,5 до 2 мкм и более. L формы обладают высокой репродуктивной способно стью и сохраняют способность реверсироваться в обыч ные спиралевидные бледные трепонемы. Установлено, что L формы бледных трепонем чрезвычайно резистент ны к внешним неблагоприятным воздействиям, напри мер, к воздействию пенициллина, их устойчивость к кото рому возрастает в десятки и сотни тысяч раз. L формы бледных трепонем не обладают антигенными свойствами или они выражены очень слабо, в связи с чем классиче ские серологические реакции у больных не развиваются. Диагноз сифилиса в этих случаях может быть установлен на основании положительных реакций иммобилизации

Бледных трепонем (РИТ) или иммунофлюоресценции (РИФ), что, к сожалению, также происходит в поздних стадиях болезни, иногда на основании тяжелых пораже ний нервной системы и внутренних органов.

На искусственных питательных средах бледные трепонемы из организма больного не растут.

Бледные трепонемы малоустойчивы к различным внешним воздействиям. Оптимальной температурой для их существования является 37 °С. При 40–42 °С вне чело вече ского организма они погибают в течение 3–6 ч, а при

55 °С - за 15 мин. В цельной крови или сыворотке при 4 °С микроорганизмы сохраняют жизнеспособность не менее 24 ч, что имеет значение при переливании крови. Бледная трепонема устойчива к низким температурам. Понижение температуры в пределах -7 °С не оказывает большого действия на жизнеспособность возбудителя си филиса; в замороженном состоянии при -18 °С он в тече ние года не теряет своей заразительности для кроликов.

В тканях трупа, особенно при его содержании на холоде, бледные трепонемы остаются жизнеспособными 2–3 сут и дольше. Они быстро погибают при высушивании. Вне организма человека (в биологических субстратах, на предметах домашнего обихода) бледная трепонема сохра няет заразительность до высыхания. Она очень чувстви тельна к воздействию химических веществ. Различные антисептические материалы губительно действуют на возбудителя сифилиса. В 40% этаноле подвижность со храняется в течение 30–40 мин, в 50–60% этаноле трепонемы теряют подвижность сразу. Кислоты и щелочи бы стро убивают трепонему. В 0,5% растворе едкой щелочи они сразу же теряют подвижность и деформируются; в мыльной пене они также быстро теряют подвижность. В разведенной уксусной кислоте трепонемы гибнут в тече ние нескольких минут, а в 0,5% растворе соляной кислоты мгновенно утрачивают подвижность. Трепонемы быстро

Гибнут в пищевых продуктах, содержащих кислоты (портвейн, лимонад, кислое молоко, квас, уксус). Они мгновенно теряют подвижность и погибают в присутст вии соединений мышьяка, ртути и висмута. Бактерицид ная активность этих веществ усиливается при повыше нии температуры тела. Пенициллины также обладает трепонемоцидной активностью даже в малых концентрациях. Однако бледные трепонемы погибают очень медленно, что объясняется замедленным размножением этих бактерий и их низкой метаболической активностью.

В порядке понижения трепонемоцидной активности антибиотики располагаются в следующем порядке: бензилпенициллин, магнамицин, эритромицин, террамицин, ауреомицин, хлормицетин, стрептомицин. Устойчивость к наиболее эффективному антибиотику бензилпеницил лину у бледных трепонем по сравнению с другими микро бами вырабатывается значительно слабее и медленнее, что позволило некоторым авторам отрицать приобретенную устойчивость бледной трепонемы к этому антибио тику.

Практический интерес представляют данные о заразительности бледной трепонемы, находящейся в консерви рованной крови. Установлено, что 5 дневной консервации достаточно для того, чтобы инактивировать возбудителя.