Номенклатура МЗРФ (Приказ №804н): A09.07.007 "Исследование уровня свободного кортизола в слюне"

Биоматериал: Слюна

Срок выполнения (в лаборатории): 5 р.д. *

Описание

Определение уровня кортизола необходимо для диагностики болезни Иценко-Кушинга, поражения надпочечников и для обследования детей с дефицитом роста и избыточной массой тела.

Кортизол относится к группе основных гормонов, синтез которых осуществляется корой надпочечников. Стимулирующее действие на синтез кортизола оказывает адренокортикотропный гормон, а управление осуществляет кортикотропин-рилизинг-гормон (КРГ), вырабатывающийся в гипоталамусе.
Кортизол циркадно зависим, это значит, что максимальное его количество регистрируется в утренние часы, около 7-9, а вечером его уровень снижается до 50%. В сыворотке крови кортизол находится в комплексе, связанном со стероидными транспортными белками. Именно по этой причине, для повышения информативности исследования учеными предложено определение уровня кортизола в слюне, поскольку уровень кортизола в слюне соответствует его концентрации в сыворотке.
Слюна не содержит метаболиты кортизола, как при его определении в моче, и не требует экстракции связывающих белков, как в исследовании крови, поскольку слюна их просто не содержит. Кроме того, определение кортизола в слюне оптимально подходит для концентрационного контроля его уровня при различных циркадных ритмах и позволяет использовать данную методику исследования даже в детской практике.

Определение уровня кортизола необходимо для диагностики болезни Иценко-Кушинга, поражения надпочечников и для обследования детей с дефицитом роста и и

Показания к назначению

• многочисленные и прогрессирующие симптомы, характерные для синдрома/болезни Иценко-Кушинга (ожирение, артериальная гипертензия, гипергликемия, миопатия, плетора, остеопороз, патологические переломы, красные стрии, повышенная травматичность кожи и мягких тканей, НМЦ);
• нетипичные клинические симптомы для возраста пациента (остеопороз, артериальная гипертензия);
• у детей с отставанием в росте и избыточным весом;
• инциденталома надпочечников, имеющая визуальные признаки аденомы;
• контроль терапии ГКС;
• диагностика заболеваний коры надпочечников.

Подготовка к исследованию

Время сбора образцов слюны и их количество определяет врач!

Если нет указаний направляющего врача, материал для исследования собирается в вечернее время в период с 22:00 до 24:00.

• За сутки и в течение всего периода сбора слюны исключить физические нагрузки, не употреблять кофеин (чай, кофе, кофеиносодержащие энергетические напитки, продукты, жевательная резинка), алкоголь;
• За один час до сбора слюны не курить;
• За 30 минут до сбора слюны не употреблять пищу, не чистить зубы, в том числе не использовать зубную нить и ополаскиватель для полости рта, не жевать жевательную резинку;
• За 10 минут до сбора слюны прополоскать рот водой;
• Прием седативных препаратов, кортизона ацетата, эстрогенов, пероральных контрацептивов, глюкокортикоидных препаратов (в т. ч. мазей) может вызвать повышение уровня кортизола. Отмена лекарственных препаратов осуществляется строго по рекомендации лечащего врача.

Этот гормон играет ключевую роль в защитных реакциях организма на стресс. Помимо этого кортизол:

• Обладает катаболическим действием.
• Повышает концентрацию глюкозы в крови за счёт увеличения её синтеза и снижения утилизации на периферии (антагонист инсулина).
• Уменьшает образование и увеличивает расщепление жиров, способствуя гиперлипидемии и гиперхолестеринемии.
• Обладает небольшой минералокортикоидной активностью, но при избыточном его образовании наблюдается задержка натрия в организме, отёки и гипокалиемия; формируется отрицательный баланс кальция. Кортизол потенцирует сосудосуживающее действие других гормонов, увеличивает диурез.
• Оказывает противовоспалительное действие и уменьшает гиперчувствительность организма к различным агентам, супрессивно действуя на клеточный и гуморальный иммунитет.
• Стабилизирует мембраны лизосом.
• Способствует уменьшению количества зозинофилов и лимфоцитов в крови при одновременном увеличении нейтрофилов, эритроцитов и тромбоцитов.

Снижение выработки кортизола может сопровождаться неспецифичными симптомами: похудением, слабостью, усталостью, снижением артериального давления, болью в животе. При сочетании сниженной продукции кортизола и сильного стресса иногда развивается адреналовый криз, который требует экстренной медицинской помощи.

Избыток кортизола приводит к повышению артериального давления и уровня сахара в крови, к ожирению, истончению кожи и появлению фиолетовых растяжек по бокам живота.

Особые указания: В связи с тем, что кортизол является гормоном стресса, перед процедурой сдачи крови необходимо в течение 20 минут успокоиться, расслабиться. Уровень кортизола циклически изменяется в течение суток, поэтому наиболее информативны результаты исследований, проведенных утром до 9 часов.

ОБЩИЕ ПРАВИЛА ПОДГОТОВКИ К ИССЛЕДОВАНИЯМ:

1. Для большинства исследований кровь рекомендуется сдавать утром, в период с 8 до 11 часов, натощак (между последним приемом пищи и взятием крови должно пройти не менее 8-ми часов, воду можно пить в обычном режиме), накануне исследования легкий ужин с ограничением приема жирной пищи. Для тестов на инфекции и экстренных исследований допустимо сдавать кровь через 4-6 часов после последнего приема пищи.

2. ВНИМАНИЕ! Специальные правила подготовки для ряда тестов: строго натощак, после 12-14 часового голодания, следует сдавать кровь на гастрин-17, липидный профиль (холестерин общий, холестерин-ЛПВП, холестерин-ЛПНП, холестерин-ЛПОНП, триглицериды, липопротеин (а), аполипо-протен А1, аполипопротеин В); глюкозотолерантный тест выполняется утром натощак после 12-16 часов голодания.

3. Накануне исследования (в течение 24 часов) исключить алкоголь, интенсивные физические нагрузки, прием лекарственных препаратов (по согласованию с врачом).

4. За 1-2 часа до сдачи крови воздержаться от курения, не употреблять сок, чай, кофе, можно пить негазированную воду. Исключить физическое напряжение (бег, быстрый подъем по лестнице), эмоциональное возбуждение. За 15 минут до сдачи крови рекомендуется отдохнуть, успокоиться.

5. Не следует сдавать кровь для лабораторного исследования сразу после физиотерапевтических процедур, инструментального обследования, рентгенологического и ультразвукового исследований, массажа и других медицинских процедур.

6. При контроле лабораторных показателей в динамике рекомендуется проводить повторные исследования в одинаковых условиях – в одной лаборатории, сдавать кровь в одинаковое время суток и пр.

7. Кровь для исследований нужно сдавать до начала приема лекарственных препаратов или не ранее, чем через 10–14 дней после их отмены. Для оценки контроля эффективности лечения любыми препаратами нужно проводить исследование спустя 7–14 дней после последнего приема препарата.

Если Вы принимаете лекарства, обязательно предупредите об этом лечащего врача.

Оценка состояния надпочечниковых желез

Общая характеристика

Слюна содержит свободный, стабильный кортизол, уровень которого не зависит от содержания кортизол-связывающего глобулина, так как из кровотока пассивная диффузия липофильных молекул стероидов происходит через барьеры липофильных слоев капилляров и эпителиальных клеток слюнных желез быстрее, чем гидрофильных молекул пептидов. Однонаправленность изменения концентрации кортизола в крови и в слюне как при нормальном циркадном ритме секреции (пик в 7-9 часов утра, уровень минимален в полночь), так и при его нарушении (гипокортицизм, эндогенный гиперкортицизм) позволяет использовать данное исследование как скрининг на гиперкортицизм (дважды исследуется кортизол в слюне в 23-24.00 в разные дни) и мониторинг гормонзаместительной терапии гидрокортизоном при гипокортицизме (до приема препарата per os, через 2, 4 и 6 часов после или утром, пиковый уровень после приема и уровни понижения перед дальнейшими приемами гидрокортизона). Преимущества методики определения свободного кортизола в слюне (в отличие от исследований свободного кортизола в суточной моче, АКТГ и кортизола в крови) - биоматериал стабилен (при комнатной температуре сохраняется до 7 суток), забор биоматериала безболезненный, неинвазивный, нетрудоемкий, не затратный по времени, не нужны: участие среднего медперсонала, госпитализация, фармакологическое воздействие.

Показания для назначения

1. Эндогенный гиперкортицизм (обусловленный как повышенной секрецией АКТГ опухолью гипофиза, АКТГ-продуцирующей карциноидной опухолью любой локализации, так и первичной патологией надпочечников. Скрининг в следующих группах:- Пациенты с нехарактерными для их возраста проявлениями (например остеопороз, артериальная гипертензия в молодом возрасте);- Пациенты с клиническими проявлениями гиперкортицизма; - Дети с отставанием в росте и увеличением веса (! патогномоничность сочетания симптомов); - Пациенты с инциденталомами надпочечников. 2. Гипокортицизм - мониторинг гормонзаместительной терапии таблетированными формами гидрокортизона. (! Диагностический тест первого ряда для первичной надпочечниковой недостаточности-уровень кортизола в сыворотке (снижен) и АКТГ в плазме крови (повышен).

Маркер

Маркер нарушений регулирующей функции гипофиза и глюкокортикоид-синтезирующей функции надпочечников.

Клиническая значимость

1. Скрининг на гиперкортицизм 2. Мониторинг гормонозаместительной терапии гидрокортизоном при гипокортицизме

Состав показателей:

Кортизол (в слюне)

Метод : Твердофазный иммуноферментный анализ
Диапазон измерений : 0,2-3750,0
Единица измерения : Нанограмм на миллилитр

Референтные значения:

Комментарии

Выполнение возможно на биоматериалах:

Биологический материал

Условия доставки

Контейнер

Условия доставки:

24 Час. при температуре от 2 до 25 градусов Цельсия

Контейнер:

Контейнер Sarstedt Cortisol-Salivette

5 Миллилитров

Правила подготовки пациента

У детей рекомендуется собирать слюну данным способом с 5-летнего возраста (для предотвращения проглатывания тампона). Слюна собирается в специальный контейнер (время забора указывает врач) - Sarstedt Cortisol-Salivette. В слюне не должно быть крови (не проводить исследование при обострении заболеваний полости рта,не проводить чистку зубов щеткой или нитью, не употреблять пищу и напитки перед сбором образца слюны в течение 30 минут). Необходимо удалить помаду или бальзам для губ. В течение 1 часа перед сбором образца пациент должен быть в спокойном состоянии (физическая активность или эмоциональное возбуждение повышают уровень кортизола). Не курить, не жевать табак. За сутки перед исследованием необходимо воздержаться от употребления алкоголя, солодки. Несоблюдение условий подготовки искажает результат.

Интерференция:

• Использование глюкокортикоидов как перорально, так и ректально, ингаляционно, иньекционно, местно - в том числе в виде кожных кремов, травяных лекарств, "тоников" с отбеливающими агентами, внутрисуставных и невральных иньекций, а также - применения меге

Интерпретация:

• Скрининг на гиперкортицизм - ночной кортизол в слюне (два измерения 23.00-24.00 в разные дни): 1. Результаты в норме, при этом а) клинически высокая степень вероятности синдрома - показано выполнение еще одного метода (определение уровня свободного кортизола в суточной моче; малая проба с дексаметазоном (определение уровня кортизола в крови утром после приема 1 мг дексаметазона накануне в 23:00), длинный тест с дексаметазоном (2 мг в день в течение 48 ч) .б) клинически малая степень вероятности синдрома - дальнейшая диагностика не показана, предлагается повторное обследование через 6 месяцев при прогрессировании симптомов.2. Один аномальный результат - показано выполнение еще одного метода (определение уровня свободного кортизола в суточной моче; малая проба с дексаметазоном (определение уровня кортизола в крови утром после приема 1 мг дексаметазона накануне в 23:00), длинный тест с дексаметазоном (2 мг в день в течение 48 ч). .
• Мониторинг гормонзаместительной терапии гидрокортизоном при гипокортицизме (до приема препарата per os, через 2, 4 и 6ч после или утром, пиковый уровень после приема препарата и уровни снижения перед последующими принимаемыми дозами), позволяет индивидуал

Описание

Метод определения электрохемилюминесцентный анализ (ЭХЛА, ECLIA), технология Cobas e601, Roche.

Исследуемый материал Слюна

Доступен выезд на дом

Кортизол - основной глюкокортикоидный гормон коры надпочечников, который участвует в гормональной регуляции функций организма в стрессовых ситуациях. Выделение его надпочечниками контролируется посредством классической петли отрицательной обратной связи с участием кортикотропин-рилизинг фактора гипоталамуса и адренокортикотропного гормона (АКТГ) гипофиза.

Патологическое повышение уровня кортизола, обусловленное его неконтролируемой секрецией, ведет к характерным метаболическим и клиническим проявлениям (синдром Иценко-Кушинга). Различают АКТГ-зависимую и АКТГ-независимую формы этого синдрома. Болезнь Иценко-Кушинга – наиболее часто встречающаяся причина гиперпродукции кортизола, связанная с гиперсекрецией АКТГ микроаденомой гипофиза. Для болезни Иценко-Кушинга характерно повышение выработки кортизола и потеря нормального суточного ритма его секреции (в норме секреция кортизола снижается в вечернее время).

Клинические проявления болезни Иценко-Кушинга разнообразны и во многом неспецифичны, поэтому в дифференциальной диагностике этой патологии большую роль играют лабораторные тесты. Поскольку уровень кортизола в крови подвержен значительным вариациям (в том числе в ответ на процедуру взятия крови), для первоначального скрининга эндогенного гиперкортицизма рекомендуют использовать следующие тесты выбора:

Определение уровня кортизола в моче требует сбора суточной мочи и оценки выделения за сутки, чтобы устранить влияние колебаний концентрации кортизола мочи в зависимости от процессов концентрирования мочи и текущего объема выделяемой мочи. Сбор суточной мочи не всегда удобен для пациента и связан с риском ошибок расчета при неверно указанном объеме мочи за сутки. Концентрация кортизола в слюне не проявляет такой зависимости, поэтому исследование уровня кортизола в слюне может проводиться в разовой порции слюны. Исследование уровня кортизола в слюне, собранной в вечернее время (в 23.30), является наиболее комфортным для пациента и достаточно точным тестом скрининга эндогенного гиперкортицизма. Сбор слюны с помощью специального устройства может выполняться пациентом в домашних условиях, методика неинвазивна и безболезненна, что минимизирует вероятность стресса. Концентрация кортизола в слюне отражает уровень свободного кортизола в крови, поскольку кортизол-связывающие белки не поступают в слюну. Тест применим при обследовании женщин, принимающих гормональные контрацептивы.

При скрининге оправдано проведение как минимум двух тестов первой линии выбора. При расходящихся результатах двух тестов показано проведение дополнительных исследований. Если оба теста дают отрицательный результат, диагноз болезни Иценко-Кушинга маловероятен (в случае подозрения на циклическое течение заболевания может быть полезным наблюдение в динамике).

При выявлении повышенного уровня кортизола следует исключить функциональные причины гиперкортицизма. Оценка, связанная с суточным биологическим ритмом кортизола, неинформативна у людей, работающих в ночную смену и/или часто пересекающих часовые пояса.

Пределы определения: 1,5 нмоль/л - 1750 нмоль/л

Литература

1. Белая Ж.Е. с соавт. Автоматизированный электрохемилюминесцентный метод определения кортизола в слюне для диагностики эндогенного гиперкортицизма среди пациентов с ожирением. Ожирение и метаболизм. - М. 2011;2:56-63.
2. Белая Ж.Е., Рожинская Л.Я., Мельниченко Г.А., Дедов И.И. Современный взгляд на скрининг и диагностику эндогенного гиперкортицизма. Проблемы эндокринологии. - М. 2012; 4:35-41.
3. Федеральные клинические рекомендации (проект). Болезнь Иценко-Кушинга: клиника, диагностика, дифференциальная диагностика, методы лечения. Российская ассоциация эндокринологов. - М. 2014 г. http://www.endocrincentr.ru/images/material-images/bic.pdf.
4. Nieman L.K. et al. The Diagnosis of Cushing"s Syndrome: An Endocrine Society Clinical Practice Guideline. The Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism. 2008; 93(5):1526-1540. http://www.endocrincentr.ru/images/material-images/bic.pdf.

Подготовка

Перед проведением исследования необходимо уточнить применение пациентом лекарственных средств, чтобы исключить вероятность влияния на результат текущего или недавнего применения препаратов группы глюкокортикоидных гормонов. Накануне исследования необходимо исключить приём алкоголя, за час до исследования - курение, прием пищи, чистку зубов (исключить любые действия, вызывающие кровоточивость десен).

За 10 минут до сбора слюны ополоснуть рот водой. Для взятия пробы необходимо специальное устройство для сбора слюны – контейнер с тампоном для сбора слюны Salivette® (см. инструкцию по сбору слюны).

Если нет иных указаний направляющего врача, взятие пробы слюны для исследования кортизола в целях скрининга болезни Иценко-Кушинга проводится в вечернее время (23.30-00.30).

Показания к назначению

Обследование для исключения эндогенного гиперкортицизма целесообразно проводить пациентам следующих групп:

• молодые люди с необычными для их возраста проявлениями (остеопороз, сахарный диабет, ожирение, артериальная гипертензия, аменорея у женщин, снижение полового влечения у мужчин, быстрая прибавка массы тела в сочетании с выраженной общей и мышечной слабостью);
• пациенты с характерными изменениями внешности и разнообразными клиническими проявлениями гиперкортицизма;
• дети, у которых отмечается задержка роста в сочетании с увеличением массы тела;
• пациенты со случайно выявленным новообразованием надпочечника;
• пациенты любого возраста с плохо контролируемым сахарным диабетом и/или гипертонией в сочетании с ожирением или быстрой прибавкой массы тела;
• пациенты с переломами тел позвонков, особенно множественными переломами, в возрасте до 65 лет.

Повышение значений:

• синдром Иценко-Кушинга (ориентировочная чувствительность метода в выявлении эндогенного гиперкортицизма – 90%, специфичность – 90%);
• функциональные причины гиперкортицизма (в том числе депрессия или другая серьезная психиатрическая патология; алкоголизм; стресс, связанный с госпитализацией, хирургическим вмешательством, болью и т.д.; выраженное недоедание, тяжелое нарушение всасывания пищи; изнуряющие интенсивные тренировки);
• ятрогенный гиперкортицизм, связанный с применением глюкокортикоидов.